布鲁菌转录调节因子HFQ诱导机体免疫反应的分析

• 作者: 张慧茹 张晓婷 李志强 毕艳琪 王书利 王德娟 陈琳
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 HFQ 免疫反应
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1977-1984
• 页数: 8页
• 分类号: S855.1|S852.614
• 字数: 5533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.08.022

摘要

旨在分析布鲁菌(Brucella)转录调节因子HFQ诱导机体产生的免疫反应.以热灭活牛种布鲁菌S2308为模板,根据GenBank登录的S2308 hfq基因序列(BAB1_1134)设计引物,PCR扩增hfq基因片段后,将其克隆至原核表达载体pET-32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导HFQ蛋白表达;利用SDS-PAGE电泳以及Western blot对重组HFQ蛋白(rHFQ)进行分析;pET-32a空载体、rHFQ和疫苗株M5-90刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7,利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ和IL-4的表达水平;将pET-32a、rHFQ和M5-90免疫小鼠后,检测小鼠脾细胞中IFN-γ和IL-4的水平,以及小鼠血清中IgG抗体水平.结果显示,h f q基因大小为237 bp,编码79个氨基酸,rHFQ大约在25.8 ku处出现蛋白条带,纯化后为单一条带.Western blot结果显示,rHFQ具有较好的反应原性.rHFQ刺激RAW 264.7后,诱导IFN-γ和IL-4的水平与M5-90组相似,显著高于PBS组和pET-32a空载体组,且随着刺激时间的延长而升高.rHFQ免疫小鼠后,诱导脾细胞产生IFN-γ和IL-4的水平,小鼠血清中IgG的水平与M5-90组相似,显著高于PBS组和pET-32a空载体组.布鲁菌HFQ蛋白具有较好的反应原性,并能诱导机体产生较高的细胞免疫和体液免疫水平,是布鲁菌亚单位疫苗研制较理想的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李志强	商丘师范学院生物与食品学院	13	8	2.0	2.0
2	王书利	商丘师范学院生物与食品学院	5	0	0.0	0.0
3	张慧茹	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
4	毕艳琪	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
5	王德娟	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
6	陈琳	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0
7	张晓婷	商丘师范学院生物与食品学院	1	0	0.0	0.0