清热活血方对斑马鱼胚胎血管新生的影响及安全性

• 作者: 刘立玲 智恺 曹炜 果彤 武子英 燕美彤 王海霞 马志强
• 来源期刊: 中医杂志
• 关键词: 类风湿关节炎 清热活血方 血管新生 胚胎毒性 斑马鱼
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13288/j.11-2166/r.2020.01.016

摘要

目的 观察清热活血方对斑马鱼胚胎血管新生的抑制作用并探讨其安全性.方法 选取受精后2天的斑马鱼胚胎120个,置于12孔板中,每孔10个.分为空白组、阳性药组和清热活血方50 μg/ml、100 μg/ml、150 μg/ml、200 μg/ml组,阳性药组给予浓度为50 μg/ml瓦他拉尼(PTK787)3ml,清热活血方各浓度组给予相应浓度清热活血方3ml,各组连续给药72h,每24h更换暴露液,在体式显微镜下观察统计斑马鱼胚胎体节间血管指数及镜下荧光点数.通过预实验确定清热活血方最大非致死浓度(MNLD)为802μg/ml和最小全致死浓度(MTLD)为2560 μg/ml,在此区间设定8个药物浓度,建立致死曲线,计算半数致死浓度(LD50).选用1/10 MNLD(80 μg/ml)、1/3 MNLD(267 μg/ml)、MNLD 3个浓度作为毒性指标观察的给药浓度,给予药物暴露液3ml,连续给药72h,显微镜下计数斑马鱼胚胎心率,并记录各浓度清热活血方对各个脏器系统及其他表型指标产生的影响,包括斑马鱼胚胎卵黄、肠腔、肠褶皱、尾鳍等.结果 与空白组比较,阳性药组及清热活血方100 μg/ml、150 μg/ml、200 μg/ml组斑马鱼胚胎体节间血管指数及镜下荧光点数均降低(P＜0.O1).清热活血方100 μg/ml组、150 μg/ml组、200 μg/ml组之间比较,随着中药浓度的增加斑马鱼胚胎体节间血管指数显著降低(P＜0.05),而各组斑马鱼胚胎镜下荧光点数仅有减少趋势而差异无统计学意义(P＞0.05).根据清热活血方致死曲线可得LD50为1200 μg/ml,安全指数为5.1.与空白浓度比较,清热活血方267 μg/ml、802 μg/ml浓度干预时斑马鱼胚胎心率显著增快(P＜0.01),80 μg/ml浓度对斑马鱼胚胎心率影响不明显(P＞0.05),267 μg/ml浓度与802 μg/ml浓度对斑马鱼胚胎心率增快的程度差异无统计学意义(P＞0.05).当浓度高于267 μg/ml时,清热活血方对斑马鱼胚胎的发育表现出实质性的毒性作用,如肠褶皱消失、肠变性等. 结论 浓度为100 μg/ml的清热活血方对斑马鱼胚胎有较强的抑制血管新生的作用,且具有安全性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹炜		43	566	13.0	23.0
2	马志强		18	71	4.0	8.0
3	智恺		3	18	2.0	3.0
4	燕美彤		5	12	2.0	3.0
5	果彤		3	1	1.0	1.0