肾脏过表达GJB1基因动物模型的构建

• 作者: 罗晨芳 陈柳冰 陈潮金 黑子清
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: GJB1基因 重组腺相关病毒 急性肾损伤 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 817-823
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2020.11.003

摘要

目的 构建小鼠过表达GJB1基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体,建立一种小鼠肾脏过表达GJB1基因的动物模型.方法 采用PCR扩增制备小鼠GJB1基因片段,利用基因重组技术构建含GJB1基因的重组质粒,将携带小鼠GJB1基因的腺相关病毒(AAV)穿梭质粒与pAAV-RC、pHelper共转染AAV-293细胞,通过选择培养基筛选出同源重组的阳性克隆获得rAAV.将30只成年C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组各6只(W1组、W2组、W3组、W4组及空白对照组),经尾静脉将rAAV注射到W1～W4组小鼠体内,分别于注射后1周、2周、3周、4周取其心脏、肝脏、肾脏组织行PCR检测GJB1 mRNA的表达情况,并经石蜡包埋切片后采用免疫组织化学法检测Cx32的表达.结果 含GJB1基因的rAAV被成功构建.随着注射后时间的延长,小鼠肾脏组织GJB1基因转录及Cx32蛋白表达强度均逐渐增强,与空白对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05),而其他器官(肝脏、心脏)GJB1基因表达未见明显增强(P均>0.05).结论 采用rAAV技术可成功构建肾脏过表达GJB1基因的小鼠模型,这对深入研究GJB1基因在肾损伤中的作用机制、评估以GJB1为治疗靶点的药物疗效等具有重要的科学价值和临床意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黑子清		173	1020	17.0	22.0
2	罗晨芳		33	121	6.0	9.0
3	陈潮金		8	11	2.0	3.0
4	陈柳冰		1	0	0.0	0.0