敲除abaR基因对鲍氏不动杆菌生长代谢和生物膜形成的影响

• 作者: 向军 郭海娜 陈征
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 鲍氏不动杆菌 基因敲除技术 群体感应 生物膜
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著·烧伤感染
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2020.01.006

摘要

目的 探讨敲除abaR基因对鲍氏不动杆菌生长代谢和生物膜形成的影响. 方法 应用同源重组方法敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978(野生株)abaR基因,获得ATCC 17978 abaR敲除株(ATCC 17978/△abaR::Kn),通过PCR电泳和测序验证.应用酶标仪测定鲍氏不动杆菌野生株和敲除株培养18h内的生长曲线,同时应用结晶紫染色法分别于培养8、24、48 h,测定生物膜形成能力,结果均以吸光度值表示,每个时间点样本数为3.对数据进行析因设计方差分析、单因素方差分析、t检验、LSD检验. 结果 (1)打靶片段△abaR∷Kn的PCR产物大小为3 029 bp.ATCC 17978野生株成功敲除abaR基因后获得ATCC 17978敲除株(ATCC 17978/△abaR:∷Kn),敲除株PCR产物大小3 300 bp,说明abaR基因被成功敲除.(2)培养2、3、4 h,鲍氏不动杆菌野生株吸光度值稍高于敲除株;培养5～18h,鲍氏不动杆菌野生株和敲除株各时间点吸光度值相近.(3)培养8、24 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(0.644±0.066、0.574±0.184)与敲除株(0.559±0.008、0.394±0.030)相近(t=2.209、1.167,P＞0.05);培养48 h,鲍氏不动杆菌野生株生物膜形成能力(1.157±0.259)明显强于鲍氏不动杆菌敲除株(0.576±0.026,t=3.865,P＜0.05).鲍氏不动杆菌野生株培养48 h的生物膜形成能力明显强于培养8、24 h(P＜0.05),鲍氏不动杆菌敲除株培养24 h的生物膜形成能力明显弱于培养8、48 h(P＜0.05). 结论 利用同源重组方案,可成功敲除鲍氏不动杆菌ATCC 17978 abaR基因,获得鲍氏不动杆菌敲除株ATCC 17978/△abaR∷Kn.敲除abaR基因后,鲍氏不动杆菌自身的生长代谢不受影响,但其生物膜形成能力明显减弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	向军	上海交通大学医学院附属瑞金医院灼伤整形科	19	129	5.0	11.0
2	陈征	上海交通大学医学院附属瑞金医院灼伤整形科	5	5	2.0	2.0
6	郭海娜	上海交通大学医学院附属瑞金医院灼伤整形科	5	3	1.0	1.0