柴胡皂甙D诱导肝癌细胞同时发生凋亡及类凋亡性细胞死亡

• 作者: 卢新兰 卢朝辉 和水祥 张旭 曹琰 李雅睿 王新 郭丹
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 柴胡皂甙D 细胞凋亡 类凋亡 肝癌 CHOP
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 中医药研究
• 页码范围: 966-971
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb202006030

摘要

目的 探讨柴胡皂甙D(saikosaponin-d,SSD)诱导人肝癌Hep3B细胞死亡的作用及其可能机制.方法 将肝癌Hep3B细胞分为空白对照组、DMSO(溶媒)对照组和3个SSD(5、10、15μmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式细胞仪定量检测死亡细胞的比例;Hoechst 33258染色后在形态学方面检测细胞凋亡;分光光度法检测半胱天冬酶-3 (caspase-3)凋亡蛋白酶活性;倒置显微镜观察细胞形态改变;Western blotting和Real-time PCR技术分别用于检测CHOP(C/EBP homology protein)蛋白和mRNA表达.结果 MTT结果显示,SSD浓度和时间依赖性抑制Hep3B细胞生长;流式细胞术结果表明SSD诱导Hep3B细胞死亡;Hoeehst 33258染色后在荧光显微镜下观察,发现SSD处理组的细胞核出现凋亡细胞特征性的核染色体凝集、核固缩和碎裂;SSD可明显激活关键的凋亡执行分子caspase-3;通过倒置显微镜观察到SSD处理的细胞内出现大量空泡样改变——类凋亡的发生;总caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理能够有效抑制caspase-3活性,但仅能部分抑制SSD诱导的细胞死亡,且不能减少SSD诱导的细胞内空泡形成;SSD诱导应激诱导性分子CHOP蛋白和mRNA表达上调,该作用不能被Z-VAD-FMK抑制.结论 SSD可诱导人肝癌Hep3B细胞同时发生caspase依赖性凋亡和非caspase依赖性类凋亡,其中CHOP表达升高可能是参与SSD诱导类凋亡的分子机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	和水祥	西安交通大学第一附属医院	102	703	16.0	21.0
2	张旭	西安交通大学第一附属医院	69	783	13.0	26.0
3	卢朝辉	西安交通大学第一附属医院	11	66	5.0	8.0
4	卢新兰	西安交通大学第一附属医院	17	117	7.0	10.0
5	王新	西安交通大学第一附属医院	12	85	4.0	9.0
6	郭丹	西安交通大学第一附属医院	8	13	2.0	3.0
7	李雅睿	西安交通大学第一附属医院	3	1	1.0	1.0
8	曹琰	西安交通大学第一附属医院	2	0	0.0	0.0