miR-128-1-Sp对绵羊前体脂肪细胞增殖和分化调节作用的研究

• 作者: 乔利英 刘建华 刘文忠 刘旭莹 安丽霞 梁煜 王凤 王强 赵弼时 车雨彤
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 前体脂肪细胞 miR-128-1-5p KLF2 增殖 分化
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 1207-1218
• 页数: 12页
• 分类号: S826.2
• 字数: 8216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.06.005

摘要

旨在研究miR-128-1-5p对绵羊前体脂肪细胞增殖与分化的调节作用.本研究经理论预测和试验研究验证miR-128-1-5p的靶基因;过表达miR-128-1-5p后,用qPCR检测增殖标志基因的表达,CCK-8和EdU检测细胞增殖情况;用qPCR和Western blotting检测miR-128-1-5p和其靶基因在前体脂肪细胞分化中的表达趋势;通过过表达或抑制miR-128-1-5p研究其对绵羊前体脂肪细胞分化的调节机制;用油红O染色检测成脂能力.结果 表明,KLF2是miR-128-1-5p的靶基因.前体脂肪细胞增殖过程中,过表达miR-128-1-5p后,增殖标志基因的表达量显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),细胞活力显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),新生细胞数显著减少(P＜0.05).前体脂肪细胞分化过程中,miR-128-1-5p与KLF2的表达呈负相关;过表达miR-128-1-5p极显著下调了KLF2 mRNA的表达量(P＜0.01),显著下调了KLF2蛋白的表达量(P＜0.05),显著或极显著上调了分化标志基因mRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01),产生更多脂滴;抑制miR-128-1-5p则结果相反.综上所述,miR-128-1-5p与KLF2存在结合位点.miR-128-1-5p抑制绵羊前体脂肪细胞的增殖,在分化过程中通过靶向抑制KLF2的表达,促进前体脂肪细胞分化和脂滴沉积.