滩羊肌内前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究

• 作者: 徐小春 赵瑞 陈文娟 马森
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 滩羊 肌内前体脂肪细胞 诱导分化 成脂基因
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 分类号: S811.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2020.11.007

摘要

研究旨在建立滩羊肌内前体脂肪细胞的体外培养体系,并探讨其在诱导分化过程中成脂关键基因的表达规律.采集10日龄滩羊背最长肌组织,用Ⅱ型胶原酶消化分离肌内前体脂肪细胞,进行细胞的原代、传代培养和形态学观察,继而对获得的细胞进行诱导分化和油红O染色鉴定.同时,采用qRT-PCR检测参与前体脂肪细胞成脂分化的关键基因PPARγ、C/EBPα、FAS、aP2、LPL mRNA在诱导第0、2、4、6、8d的表达水平变化.结果 表明:(1)滩羊原代肌内前体脂肪细胞在分离后约4h时开始贴壁,贴壁的细胞呈现为小梭形与不规则三角形.经过传代后,细胞成分均一并且贴壁良好,呈现成纤维细胞样形态;细胞传代第2～6 d为指数生长期,其生长曲线近似“S”形;(2)细胞诱导分化第8天时,油红O染色呈红色,细胞具有前体脂肪细胞的典型特征;(3)PPARγ和FAS的表达水平在第6天时最高,随着诱导时间增长PPARγ表达先升高后降低,FAS表达先降低后升高再降低;C/EBPα、aP2和LPL的表达量在第4d最高,随着诱导分化时间增长,C/EBPα和LPL表达先升高后降低,aP2表达先升高后降低再升高.