绵羊GlyCAM-1基因克隆、核苷酸变异及其组织表达分析

• 作者: 刘秀 李少斌 王继卿 罗玉柱 胡江 郝志云
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: GlyCAM-1基因 乳腺 绵羊 克隆 组织表达 SNPs
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1690-1697
• 页数: 8页
• 字数: 5894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.08.1690

摘要

糖基化依赖细胞粘附分子(GlyCAM-1)是粘液素(mucin)糖蛋白家族的成员,是乳腺细胞合成的一种乳脂球膜蛋白(MFGMPs)的重要组成部分.GlyCAM-1在乳腺发育和泌乳中发挥着重要作用,为探究该基因的序列特征、核苷酸序列变异和表达特征,以高泌乳量的小尾寒羊(泌乳高峰期和空怀期)和低泌乳量的甘肃高山细毛羊(泌乳高峰期)的乳腺组织为研究对象,利用克隆测序、RT-qPCR、生物信息学等方法克隆绵羊GlyCAM-1基因的编码区,分析GlyCAM-1的理化性质和蛋白质结构,并检测GlyCAM-1基因的组织表达特性.结果 表明,绵羊的GlyCAM-1基因CDS区全长465 bp,编码154个氨基酸.测序结果表明,在该基因CDS区检测到7个SNPs,其中2个为同义突变,5个为错义突变.GlyCAM-1二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,延伸链则散布于整个蛋白质结构中.String分析结果表明,GlyCAM-1蛋白与CD34、MadCAM-1都作为L-选择素(L-selectin)的配体发挥作用;RT-qPCR结果表明,GlyCAM-1基因表达具有组织特异性、品种特异性和时空特异性,乳腺、心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、卵巢和背最长肌8个组织中,GlyCAM-1基因只在乳腺和肺脏组织中表达,在其余6个组织中均不表达,其中乳腺中的表达量最高;在泌乳高峰期的乳腺组织中,GlyCAM-1在高泌乳量的小尾寒羊中的表达量显著高于甘肃高山细毛羊(P＜0.05);在小尾寒羊的乳腺组织中,GlyCAM-1在泌乳高峰期的表达量极显著高于空怀期(P＜0.01).本研究结果丰富了绵羊基因组数据,为深入研究GlyCAM-1基因的泌乳生物学功能及其机理提供了基础数据.