细胞焦亡在胆红素诱导小胶质细胞损伤中的作用研究

• 作者: 何春梅 华子瑜 张燕 李思宇 黄洪梅
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 胆红素 细胞焦亡 神经毒性 大鼠 小胶质细胞
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 1027-1033
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2003175

摘要

目的 探讨细胞焦亡是否参与胆红素诱导原代培养大鼠大脑皮质小胶质细胞的损伤.方法 原代培养大鼠大脑皮质小胶质细胞,随机分为胆红素组(30?μmol/L胆红素刺激)、VX-765+胆红素组(30?μmol/L VX-765预处理1?h,再用30?μmol/L胆红素刺激)、对照组(等体积二甲基亚砜处理).改良MTT法检测小胶质细胞存活率;Western blot法检测焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、gasdermin D(GSDMD)表达;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞毒性作用;不同分子量染料EtBr/EthD2(分子量394?Da/1?293?Da)染色检测细胞膜孔大小;ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子IL-1β水平.结果 胆红素刺激后,小胶质细胞存活率随时间依赖性下降;LDH释放呈时间依赖性增加;胆红素组小分子染料EtBr通过细胞膜阳性率明显高于对照组(P<0.001),但各组大分子染料EthD2通过率比较差异无统计学意义(P>0.05);胆红素刺激后0.5?h活化型Caspase-1、6?h活化型GSDMD表达增加(P<0.05);IL-1β水平在胆红素刺激后6?h明显增加,24?h达高峰(P<0.001).与胆红素组相比,VX-765+胆红素组细胞存活率升高(P<0.05),活化型GSDMD表达、EtBr通过率、LDH及IL-1β释放均减少(P<0.05).结论 细胞焦亡参与胆红素诱导的原代培养小胶质细胞损伤.