Caveolin 3蛋白与心脏Kv1.5钾通道的相互作用及鉴定

• 作者: 林吉进 马青艳 黄蕾
• 来源期刊: 岭南心血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: caveolin3 KCNA5 蛋白与蛋白的相互作用 酵母双杂交技术 膜片钳技术
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 709-715,718
• 页数: 8页
• 分类号: R33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9688.2020.06.01

摘要

目的 探索caveolin 3蛋白与Kv1.5钾通道是否存在相互作用,并进一步明确caveolin3对心脏Kv1.5钾通道功能的调控作用.方法 (1)将携带caveolin 3的N端片段的pGBKT7载体转染Y187,与含人类心脏cDNA文库进行酵母双杂交,筛选与caveolin 3存在相互作用的心肌蛋白;(2)免疫荧光细胞化学分析:pEGFP-N3-KCNA5和质粒pDsRed2-N1-cav3共转染HEK293细胞,应用荧光显微镜观察caveolin 3蛋白和KCNA5蛋白的细胞亚定位情况;(3)细胞电生理检查:应用膜片钳技术记录表达caveolin 3蛋白时,观察Kv1.5钾通道电流幅度和电流密度比的变化.结果 (1)经过严格筛选,人类心脏cDNA文库中发现Kv1.5钾通道与caveolin 3-NT存在相互作用.(2)荧光免疫细胞化学分析发现在哺乳细胞中Kv1.5与caveolin 3存在细胞共定位,并主要在细胞膜上表达.(3)膜片钳技术检测发现,在电压分别为-10、0、10、20、30、40、50、60 mV时,caveolin 3蛋白的表达明显减小了Kv1.5钾通道电流幅度和电流密度比,具有统计学意义(P<0.05).结论 Caveolin 3蛋白对心脏Kv1.5钾通道的功能具有负性调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马青艳		1	0	0.0	0.0
2	林吉进		2	0	0.0	0.0
3	黄蕾		1	0	0.0	0.0