摘要:
目的 建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃炎小鼠模型,探讨新蒲饮与奥美拉唑联用对幽门螺杆菌的根除效果以及对Toll样受体2(Toll-liκe receptor-2,TLR-2)/髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核转录因子κappaB (Nuclear Factor κappa B,NF-κB)信号通路和下游的炎症因子肿瘤坏死因子-α (Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-α(Interleu κin-1β,IL-1β)的干预机制.方法 50只6-8周龄SPF级C57BL/6小鼠(雌雄各半)为研究对象,按随机数字表法标记并按不同性别分笼造模.共分为5组:对照组(正常组、模型组)、新蒲饮组、新蒲饮加奥美拉唑(PPI)组、西药三联组(阿莫西林+克拉霉素+奥美拉唑).模型组、新蒲饮组、新蒲饮加PPI组、西药三联组进行幽门螺杆菌相关性胃炎造模:适应性饲养1周之后接种幽门螺杆菌菌液,灌胃3次(隔日一次).定植4周后随机从各组中抽取1只雄鼠和1只雌鼠,用快速尿素酶法以及Giemsa染色法检验造模是否成功.第42天给药组予相应浓度药物灌胃,对照组给予生理盐水灌胃,2次/日,连续2周.灌胃结束4周以后处死所有小鼠.用快速尿素酶法以及Giemsa染色法检测幽门螺杆菌根除率,并在光镜下观察HE染色胃黏膜炎症情况;应用免疫组化技术检测胃组织中TLR-2、MyD88、NF-κB的蛋白含量表达;Western-Blot技术检测胃组织中TLR-2、MyD88、NF-κB、IκB激酶-α(IκK-α)、磷酸化IκB-α (p-IκB-α)蛋白含量表达;qPCR技术检测胃组织中TLR-2、MyD88、NF-κB的mRNA表达水平;最后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF-α、IL-1β的表达变化.结果 与正常组比较,模型组小鼠幽门螺杆菌根除率降低,胃黏膜组织炎症情况严重,蛋白表达TLR2、MyD88、NF-κB、IκK-α、p-IκB-α以及基因表达TLR2、MyD88、NF-κB和下游炎症因子TNF-α、IL-1β含量升高(P<0.05);与模型组比较,新蒲饮组、新蒲饮加PPI组及西药三联组的幽门螺杆菌根除率升高,胃粘膜组织炎症情况改善,TLR2、MyD88、NF-κB、IκK-α、p-IκB-α以及下游炎症因子TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.05);与新蒲饮组相比,新蒲饮+PPI组、西药三联组的幽门螺杆菌根除率升高,但差异无统计学意义;胃黏膜组织炎症改善,TLR2、MyD88、NF-κB、IκK-α、p-IκB-α以及下游炎症因子TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.05);新蒲饮加PPI组与西药三联组幽门螺杆菌根除率差异无统计学意义(P>0.05),胃黏膜组织炎症情况大致相同,TLR2、MyD88、NF-κB、IκK-α、p-IκB-α以及下游炎症因子TNF-α、IL-1β含量变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 1、幽门螺杆菌相关性胃炎发生的机制可能与TLR-2/MyD88/NF-κB信号通路的激活及下游炎症因子TNF-α、IL-1β释放相关;2、新蒲饮具有杀幽功效,与PPI合用杀幽效果更佳,堪比西药三联,初步猜测可能与PPI抑酸功能有关.3、新蒲饮以及新蒲饮加PPI可能通过抑制TLR-2/MyD88/NF-κB信号通路的激活及TNF-α、IL-1β的释放而发挥其抗炎作用,而新蒲饮联合PPI效果更加显著.