胶束电动色谱柱上酶反应测定低分子量肝素的抗凝血活性

• 作者: 康经武 张明瑜
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 胶束电动色谱 柱上酶反应 低分子量肝素 抗凝血活性
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1243-1248
• 页数: 6页
• 分类号: O658
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.07010

摘要

发展了一种基于胶束电动色谱(MEKC)结合柱上酶微反应的方法,用于测定低分子量肝素(LMWHs)的抗凝血活性.肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后,将ATⅢ抑制凝血因子10(FXa)活性提高了约1000倍.通过测定FXa水解生色肽底物CPS产生的对硝基苯胺(p-NP)就可以测定FXa的活性.因此,通过LMWHs抑制FXa产生的对硝基苯胺的量就可以测定抗凝血活性.该方法将毛细管柱端作为微量的酶微反应器,以呋喃妥英(nitrofuran-toin,NF)作为内标,依次将LMWHs溶液、ATⅢ溶液、FXa和CPS溶液导入毛细管柱端,反应物经过分子扩散、横向层流扩散混合和电压混合后反应.反应结束后,采用MEKC分离模式将产物对硝基苯胺与底物以及其他大分子分离,在其最大波长380 nm下测定产生对硝基苯胺的量,从而确定LMWHs的抗凝血活性.该方法具有自动化、重复性好、灵敏度高、样品消耗量少的优点,而且不受其他成分的干扰,可用于各种复杂样品(如血浆)中LMWHs抗FXa活性的监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康经武	中国科学院上海有机化学研究所	26	104	6.0	8.0
2	张明瑜	中国科学院上海有机化学研究所	1	0	0.0	0.0