p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响及机制研究

• 作者: 夏豪 徐昌武 江洪 邱立强
• 来源期刊: 中华老年心脑血管病杂志
• 关键词: p300-CBP转录因子 肌细胞,平滑肌 细胞运动 绿色荧光蛋白质类 NF-κB
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 75-78
• 页数: 4页
• 字数: 3032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0126.2020.01.020

摘要

目的 探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的作用及机制.方法 组织块贴壁法获取大鼠原代VSMC,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMC以下调PCAF表达.选择1μg/ml的脂多糖作为VSMC迁移诱导剂.将实验分为4组:不添加脂多糖(对照组)、1μg/ml脂多糖刺激(A组)、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒转染+1 μg/ml脂多糖刺激(B组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1 μg/ml脂多糖刺激(C组).采用Transwell实验检测细胞迁移水平.免疫荧光染色实验检测VSMC中NF-κB p65的核转位情况.Western blot检测PCAF、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65蛋白表达水平.结果 Western blot结果显示,与对照组比较,A组和B组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与B组比较,C组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell实验结果显示,与对照组比较,A组和B组穿出小室细胞数明显增多,差异有统计学意义[(766.30±40.86)个/视野、(794.00±76.36)个/视野vs (202.70±22.59)个/视野,P＜0.05];与B组比较,C组穿出小室细胞数明显减少,差异有统计学意义[(337.00±82.95)个/视野vs (794.00±76.36)个/视野,P＜0.05].免疫荧光染色实验结果显示,与对照组比较,A组和B组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与B组比较,C组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调PCAF的表达可明显抑制VSMC迁移,其机制可能与下调PCAF后抑制NF-κB信号通路介导的炎性反应有关.