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雄性小鼠生殖轴组织中AURKA表达定位及敲低后对双氢睾酮合成代谢的影响
雄性小鼠生殖轴组织中AURKA表达定位及敲低后对双氢睾酮合成代谢的影响
作者:
张全伟
张勇
李怡娜
王琪
甘泽
赵兴绪
赵彩英
马友记
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
激光激酶A(AURKA)
5α-还原酶1(SRD5A1)
双氢睾酮(DHT)
支持细胞
性腺轴
摘要:
极光激酶A(aurora kinase A,AURKA)是细胞周期有丝分裂调节蛋白激酶之一,参与调控生殖细胞的发生和成熟.研究表明AURKA是雄激素受体(androgen receptor,AR)的靶基因,双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)与胞内AR结合后促进精子成熟.因此,探究AURKA与DHT的作用机制对雄性动物生殖及相关疾病的研究有重要意义,但其具体作用及机制尚不完全清楚.本研究采集8周龄昆明雄性小鼠(Mus musculus)下丘脑、垂体和睾丸组织生殖轴器官组织,通过半定量PCR、免疫印迹(Western blot,WB)、苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)和免疫组化学染色(immunohistochemistry,IHC),探究AURKA在雄性小鼠性腺轴的表达规律及定位.设计AURKA-siRNA干扰序列,转染原代成年小鼠睾丸支持细胞,利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)和WB检测转染24 h后,细胞AURKA和5α-还原酶1(5α-reductase type 1,SRD5A1)基因和蛋白表达变化;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析AURKA-siRNA干扰睾丸支持细胞对DHT含量的变化.结果表明,雄性小鼠性腺轴器官的组织中AURKA基因和蛋白均有表达,且睾丸组织中其表达量极显著高于下丘脑和垂体(P<0.01);睾丸支持细胞及精子中AURKA蛋白阳性反应最强;AURKA-siRNA干扰小鼠支持细胞24 h后,AURKA基因和蛋白的表达明显下调(P<0.05),而SRD5A1基因和蛋白表达显著上调(P<0.05)且DHT的含量显著增加(P<0.05).说明AURKA负反馈调控SRD5A1表达促进DHT合成,本研究为雄性动物生殖过程中AURKA功能研究提供参考依据.
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雄性小鼠生殖轴组织中AURKA表达定位及敲低后对双氢睾酮合成代谢的影响
来源期刊
农业生物技术学报
学科
农学
关键词
激光激酶A(AURKA)
5α-还原酶1(SRD5A1)
双氢睾酮(DHT)
支持细胞
性腺轴
年,卷(期)
2020,(9)
所属期刊栏目
研究论文与报告
研究方向
页码范围
1614-1622
页数
9页
分类号
S185|Q291
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2020.09.010
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张全伟
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赵彩英
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农业生物技术学报
主办单位:
中国农业大学
中国农业生物技术学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-7968
CN:
11-3342/S
开本:
大16开
出版地:
北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室
邮发代号:
2-367
创刊时间:
1993
语种:
chi
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