羊水干细胞定向及稳定分化为神经元样细胞体系的建立

• 作者: 刘晓岚 宗凌 张兰珍 翟锦明 陈观贵 龙艳波
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 羊水干细胞 拟胚体 悬滴培养 神经元分化 神经营养因子
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 2055-2060
• 页数: 6页
• 分类号: R459.9|R394.2|R764
• 字数: 6919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2059

摘要

背景:利用干细胞分化代替受损神经元的设想,已经逐渐受到科研工作者的关注.胚胎干细胞和诱导性多能干细胞虽然具有良好的神经元分化潜能,但由于接种活体动物具有致瘤性,限制了其进一步的深入研究.目的:建立稳定的羊水干细胞分选、培养、成神经诱导分化体系,探讨其作为神经元再生种子细胞的可行性.方法:经B超引导下,穿刺获取孕19-22周期间的羊水样本10 mL,磁珠分选其中c-Kit阳性的羊水干细胞.免疫荧光染色鉴定羊水干细胞标记物Oct-4、Sox2;RT-PCR检测羊水干细胞多次传代后干性标记物c-Kit、Oct-4、Sox2、Nestin的表达;羊水干细胞悬滴培养4 d观察拟胚体的形成情况;采用"两阶段"分步诱导羊水干细胞向神经元方向分化,免疫荧光染色观察Neuro D、Tuj1的表达.结果与结论:①羊水中可分选出大约1％的c-Kit阳性羊水干细胞;②(75.0±4.6)％的羊水干细胞表达Oct-4,(86.0±2.8)％的羊水干细胞表达Sox2;③RT-PCR方法检测干性标记物c-Kit、Oct-4、Sox2、Nestin的表达量并不随细胞传代数的增加而改变;④经悬滴培养可形成拟胚体并表达Oct-4;⑤免疫荧光证实未经诱导的羊水干细胞表达神经元标记物Tuj1,但缺乏典型的神经元形态特征;RT-PCR证实不同羊水干细胞标本都能检测到Tuj1的表达,同一样本多次传代也能稳定检测到Tuj1的表达;⑥羊水干细胞经碱性成纤维细胞生长因子、脑源性神经营养因子、神经营养因子3的两阶段分步诱导后表达神经干细胞标记物Neuro D和神经元标记物Tuj1,具有神经元样细胞的形态特征.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张兰珍	广州医科大学附属第二医院产科	14	36	3.0	5.0
2	翟锦明	广州医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	14	51	5.0	7.0
3	陈观贵	广州医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	11	24	3.0	4.0
4	宗凌	广州医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	3	3	1.0	1.0
8	龙艳波	广州医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	5	11	2.0	3.0
9	刘晓岚	广州医科大学附属第二医院产科	2	2	1.0	1.0