沟叶结缕草遗传转化体系的建立

• 作者: 佘建明 刘建秀 宗俊勤 曲爱爱 李建建 李晓慧 汪毅 王凯 王蕊 郭海林
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 沟叶结缕草 蛋白二硫键异构酶(PDI) 根癌农杆菌 遗传转化
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 种质资源与遗传育种
• 页码范围: 1566-1573
• 页数: 8页
• 分类号: S688.4
• 字数: 5810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.08.009

摘要

为构建有效的沟叶结缕草遗传转化体系,以沟叶结缕草愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法将笔者单位克隆的耐盐相关基因ZmPDI基因转入野生型植株中,研究共培养时间、侵染液浓度、侵染时间和抗生素浓度等因子对转化效率的影响.结果表明:最佳遗传转化体系为菌株OD600值为0.4,侵染30 min,共培养3 d后进行选择培养.特美汀在选择培养阶段最适抑菌浓度为250 mg/L,潮霉素愈伤组织筛选的最适选择压力为40 mg/L,苗筛的最适浓度为15 mg/L.通过GUS活性的组织化学分析和PCR鉴定,显示目的基因已成功转入沟叶结缕草基因组中.