上调microRNA-27b对血小板衍生因子诱导下的人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

• 作者: 寇列玲 李迪 李雪颖 李静 车选义
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: miR-27b 人视网膜色素上皮细胞 血小板衍生因子 细胞周期 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 822-825
• 页数: 4页
• 分类号: R774.5
• 语种: 中文

摘要

目的 观察过表达的microRNA-27b(miR-27b)对血小板衍生因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导下的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)增殖的抑制作用,探讨miR-27b在ARPE细胞生物学行为中的作用及其调控机制.方法 将miR-27b过表达质粒或空载体转入ARPE-19细胞36 h后,用终浓度为20μg·L-1的PDGF预处理ARPE-19细胞5h.根据转染物不同,将实验分为空白对照组(control组)、miR-27b阴性对照组(miR-27b NC组)、miR-27b模拟物转染组(PDGF+ mimics组)和空载体转染组(PDGF+ NC组).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染后各组ARPE-19细胞中miR-27b的表达水平;MTT法测定各组细胞活性;通过流式细胞术评估各组细胞周期的分布变化;Western blot检测各组细胞周期的正向调控因子cyclinD1、CDK4和负向调控因子p21 CIP1和p27KIP1的表达水平.结果 qRT-PCR检测结果显示:经PDGF处理5h,与miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组miR-27b的表达显著降低(P＜0.01);与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的表达增加(P＜0.01).MTT检测结果显示:与miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组ARPE-19细胞的光密度(D)值增加(P＜0.01);而与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组可明显抑制ARPE-19细胞的D值(P＜0.01).流式细胞术检测结果显示:与空白对照组和miR-27b NC组相比,PDGF+ NC组G0/G1期细胞的百分比显著降低,S期细胞的百分比增加(P＜0.05);而与PDGF+ NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的过表达显著增加了G0/G1期细胞的百分比,并抑制了细胞增殖(均为P＜0.05).Western blot检测结果显示:与PDGF-NC组相比,PDGF+ mimics组miR-27b的过表达可显著降低cyclinD1蛋白和CDK4蛋白的表达,同时增强了p21 CIP1蛋白和p27 KIP1蛋白的表达(均为P＜0.05).结论 上调miR-27b表达可抑制PDGF诱导的ARPE细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李静		78	426	10.0	16.0
2	车选义		17	60	4.0	7.0
3	李迪		7	4	1.0	2.0
4	李雪颖		6	20	3.0	4.0
5	寇列玲		1	0	0.0	0.0