摘要:
目的 研究甘草素对脂多糖(LPS)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将软骨细胞分为6组:正常组(正常培养的软骨细胞),模型组(100 ng·mL-1 LPS处理软骨细胞6h)和第一实验组至第四实验组(分别用12.5,25.0,50.0,100.0 μmol·L-1甘草素培养细胞12 h,再用100ng· mL-1LPS处理软骨细胞6h).在软骨细胞中,转染anti-miR-con+ 100ng·mL-1LPS(第一转染组)、转染anti-miR-155+ 100 ng·mL-1LPS(第二转染组)、转染miR-con+ 100 ng·mL-1LpS +50 μmol·L-1甘草素(第三转染组)和转染miR-155+ 100 ng·mL-1LPS +50 μmol·L-1甘草素(第四转染组).噻唑蓝比色法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡,以实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测相关基因、蛋白表达水平.结果 正常组、模型组和第一实验组至第四实验组的细胞存活率分别为(100.00±10.24)%,(52.36±5.23)%,(63.15±6.31)%,(78.29±7.83)%,(92.89±9.30)%和(96.13 ±9.61)%.模型组与正常组相比、或者第一实验组至第四实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P <0.05).正常组、模型组、第三实验组的细胞凋亡率分别为(8.13±0.81)%,(33.22±3.32)%和(13.54±1.35)%.模型组与正常组相比、或者第三实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P< 0.05).转染后,正常组、模型组、第一转染组和第二转染组的细胞存活率分别为(100.00±10.25)%,(53.13 ±5.31)%,(52.46±5.25)%和(89.06±9.01)%;这4组细胞凋亡率分别为(8.33±0.83)%,(32.42±3.25)%,(33.46±0.33)%和(15.86±1.59)%.模型组与正常组相比、或者第二转染组与第一转染组相比,差异均有统计学意义(均P< 0.05).模型组、第三实验组、第三转染组和第四转染组的细胞存活率分别为(100.02±10.43)%,(146.15±14.22)%,(149.46±15.05)%和(112.88±11.30)%;这4组的细胞凋亡率分别为(32.42±3.25)%,(14.08±1.40)%,(14.36±1.44)%和(28.69±2.87)%,第三实验组与模型组相比、或者第四转染组与第三转染组相比,差异均有统计学意义(均P <0.05).结论 甘草素可以保护LPS诱导的软骨细胞增殖,并抑制其凋亡,这可能通过下调miR-155表达和调控Wnt/β-catenin信号通路发挥作用.