敲除ptsG基因及共表达透明颤菌血红蛋白提高大肠杆菌SHMT产量

• 作者: 刘军 吴菁 徐新星 李鑫 王儒昕 闫达中 韩琴
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Red同源重组 丝氨酸羟甲基转移酶 透明颤菌血红蛋白 ptsG基因 共表达
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 119-125
• 页数: 7页
• 分类号: Q819
• 字数: 6129字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20181114-165

摘要

利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌BL21 (DE3)的ptsG基因,得到ptsG基因缺失菌株BL21 (DE3)△ptsG.构建重组质粒,得到表达大肠杆菌丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)工程菌株BL21 (DE3) /pET-glyA、BL21 (DE3) △ptsG/pET-glyA,及共表达SHMT和透明颤菌血红蛋白(Vitreoscillahemoglobin,VHb)工程菌株BL21 (DE3) △ptsG/pET-SV.在LB培养基中,BL21 (DE3) △ptsG/pET-glyA菌株与BL21 (DE3) /pET-glyA菌株生长情况没有明显差异,BL21 (DE3) △ptsG/pET-SV菌株稳定期的OD600nm值比BL21 (DE3) △ptsG/pET-glyA菌株提高了21.3％,在LBG培养基中,稳定期BL21 (DE3) △ptsG/pET-glyA菌株OD600nm值比BL21 (DE3) /pET-glyA菌株提高了19.4％,BL21 (DE3) △ptsG/pET-SV菌株OD600nm值比BL21 (DE3)△ptsG/pET-glyA菌株提高了21.5％.在LBG培养基中,经过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,与对照菌株BL21 (DE3) /pET-28a相比较,两种单表达工程菌株产SHMT活力分别是其6.4倍和7.7倍,共表达工程菌株产SHMT活力是其9.6倍.实验结果表明,敲除ptsG基因能够增加大肠杆菌在含葡萄糖培养基中的生长量及SHMT表达量,共表达VHb能进一步提高菌株生长量和SHMT产量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫达中	武汉轻工大学生物与制药工程学院	12	5	1.0	2.0
2	刘军	武汉轻工大学生物与制药工程学院	13	24	3.0	4.0
3	王儒昕	武汉轻工大学生物与制药工程学院	3	0	0.0	0.0
4	李鑫	武汉轻工大学生物与制药工程学院	5	0	0.0	0.0
5	韩琴	武汉轻工大学生物与制药工程学院	2	0	0.0	0.0
6	吴菁	武汉轻工大学生物与制药工程学院	3	0	0.0	0.0
7	徐新星	武汉轻工大学生物与制药工程学院	1	0	0.0	0.0