尼古丁对多种干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

• 作者: 周成斌 庄建 李晓红 邱敏 陈寄梅 陈景 黄兹锐
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尼古丁 烟碱型乙酰胆碱受体 干细胞
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1287-1293
• 页数: 7页
• 分类号: R966|R363
• 字数: 4160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.07.020

摘要

目的:明确干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)亚基的表达以及尼古丁处理后受体改变的情况.方法:选择胚胎、胚胎样干细胞和成体干细胞作为探究对象.采用无饲养层细胞的方法培养人胚胎干细胞系H9和人诱导多能干细胞(IPSC);成体干细胞选择人脐带间充质干细胞(UCMSC)和人骨髓间充质干细胞(BMMSC).4种细胞传代培养后分成对照组和处理组,处理组培养基中加入尼古丁,分别提取总RNA和蛋白.采用RT-PCR、RT-qPCR和Western blot检测nAChRs亚基的mRNA和蛋白表达水平,采用细胞免疫荧光染色检测受体亚基的表达位置.结果:RT-PCR和Western blot结果显示,H9细胞、IPSC和UCMSC中均检测到nAChRs的α2、α3、α4、α7、α9和β1亚基,而BMMSC仅α4、α7、α9和β1表达明显.尼古丁处理后,RT-qPCR结果显示α2在H9细胞和UCMSC中显著下调,而在IPSC中发生上调;β2在BMMSC和IPSC中显著上调,而在UCMSC中显著下调.结论:胚胎干细胞和成体干细胞中表达的nAChRs亚基不同,且分化潜能越高,表达种类越多.尼古丁对nAChRs亚基的表达调控也存在细胞差异,其中H9细胞对尼古丁的作用表现出高敏感性.