BvM14-GAI基因的克隆及亚细胞定位

• 作者: 孙培琳 李海英 马春泉
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 甜菜M14品系 BvM14-GAI基因 生物信息学分析 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: S566.3
• 语种: 中文

摘要

GAI蛋白属于GRAS家族中的DELLA亚家族,参与植物发育、光合、抗逆等重要的植物生长过程.实验室前期在盐胁迫的转录组数据中发现甜菜M14品系GAI基因(BvM14-GAI)受盐胁迫上调表达,为了进行该基因生物学功能的研究,本研究以甜菜M14品系为材料,通过PCR技术获得BvM14-GAI基因cDNA全长序列,并进行生物信息学以及亚细胞定位分析.研究成功获得了BvM14-GAI基因cDNA序列;生物信息学分析显示,BvM14-GAI基因开放阅读框为1824 bp(包括终止密码子),编码607个氨基酸,理论分子量为66 kDa,等电点为5.37;蛋白多重序列比对和系统进化树分析显示,BvM14-G AI蛋白与菠菜(Spinacia oleracea)和藜麦(Chenopodium quinoa)中GAI蛋白亲缘关系最近;亚细胞定位预测显示定位在细胞核.进一步将BvM1 4-GAI基因与pCAMIA2300-eYFP载体重组,构建亚细胞定位载体,利用冻融法转化农杆菌EHA 105,进行烟草注射,结果显示BvM14-GAI蛋白定位在细胞核.本研究成功获得BvM14-GAI基因的cDNA全长,并确定该基因的烟草亚细胞定位在细胞核中,结果为后续该基因功能的研究提供了重要参者.