顺铂处理的肺癌细胞NSUN2 mRNA剪接异构体变化

• 作者: 俞建昆 刘晓晓 吴小海 吴翰欣 张宏伟 张沛 李明阳 李梦仙 温艳萍
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 选择性剪接 顺铂 肺肿瘤 5-甲基胞嘧啶RNA甲基化 NOP2/Sun RNA甲基转移酶2 mRNA剪接异构体
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1164-1171
• 页数: 8页
• 分类号: R34|Q752
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2020.10.008

摘要

目的:探讨顺铂(CDDP)处理肺癌细胞后NSUN2 pre-mRNA的剪接变化.方法:在NSUN2基因的pre-mRNA有选择性剪接的外显子两侧的外显子上设计检测引物,选取16例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测组织NSUN2各mRNA剪接异构体的表达;取人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞分别用不同浓度CDDP处理,A549细胞分为0、8、16、24、32、40、48及56μmol/L组,H1299细胞分为0、12、24、36、48、60、72及84μmol/L组,采用RT-PCR检测各组细胞NSUN2各mRNA剪接异构体的表达;RT-PCR产物胶回收后进行TA克隆测序并与NCBI网站数据库中NSUN2的序列进行比对分析.结果:人肺癌细胞系A549细胞和H1299细胞及肺癌临床样本中NSUN2基因可编码蛋白的mRNA剪接异构体表达量最高,占主导地位;随着CDDP浓度增加,NSUN2可编码蛋白的异构体在H1299细胞的高浓度组中的表达下降(P<0.01),非编码蛋白的异构体在A549细胞和H1299细胞的高浓度组中表达均上升(P<0.05);检测到2种未见报道的mRNA剪接异构体.结论:CDDP处理后肺癌细胞中NSUN2 pre-mRNA剪接会发生变化,NSUN2基因的表达存在pre-mRNA选择性剪接调控.