钙结合蛋白S100A4调节小鼠骨髓源肥大细胞活化的作用

• 作者: 余芳 吴通前 周萍萍 李静 袁锐 金筱茜 马岚
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠,基因敲除 肥大细胞 钙结合蛋白 β-氨基己糖苷酶 炎性因子 肥大细胞活化
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 1365-1370
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2020.12.001

摘要

目的:探讨钙结合蛋白S100A4调节小鼠骨髓源肥大细胞(BMMC)活化的作用.方法:8～10周龄野生型(WT)和S100A4基因敲除(S100A4-/-)C57BL/6健康雄性小鼠各2只,取胫骨与股骨提取骨髓进行骨髓源肥大细胞(BMMC)培养并鉴定;以成熟WT BMMC为模型细胞,实验分为S100A4蛋白处理组(1500μg/L S100A4蛋白)和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(S100A4蛋白等量体积PBS),分别于培养第1、2及3周采用甲苯胺蓝染色鉴定小鼠成熟BMMC,采用化学发光法检测各组小鼠成熟BMMC中β-氨基己糖苷酶(β-hex)的吸光度(OD),采用流式细胞术检测各组小鼠成熟BMMC的S100A4蛋白表达和白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-13(IL-13)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的荧光强度并计算相对荧光指数(rFI);以成熟WT和S100A4-/-BMMC为模型细胞,实验分为WT离子霉素(ION)处理组(1500μg/L ION)、WT PBS对照组(ION等量体积PBS)、S100A4-/-ION处理组(1500μg/L ION)及S100A4-/-PBS对照组(ION等量体积PBS),采用化学发光法检测各组小鼠成熟BMMC中 β-hex的吸光度(OD).结果:BMMC培养至3周时基本成熟,并表达S100A4蛋白;S100A4蛋白处理组成熟BMMC中 β-hex、IL-5、IL-6、IL-13及TNF-α水平高于PBS对照组(P<0.05或P<0.01);WT ION处理组成熟BMMCβ-hex、IL-5、IL-6、IL-13及TNF-α水平高于WT PBS对照组(P<0.01),S100A4-/-ION处理组成熟BMMC中 β-hex、IL-5及IL-6明显高于S100A4-/-PBS对照组(P<0.05),S100A4-/-ION处理组成熟BMMC中β-hex、IL-5、IL-6、IL-13及TNF-α水平均低于WT ION处理组(P<0.05).结论:S100A4蛋白能够直接诱导成熟BMMC活化,S100A4基因的缺失可抑制成熟BMMC活化及炎性因子的产生.