基于重组甘露糖结合凝集素蛋白-磁珠富集技术检测血流感染新型隐球菌的方法

• 作者: 卢金星 李文革 郑皓 陈小萍 陈晓丽
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 甘露糖结合凝集素 磁珠富集 血流感染 新型隐球菌
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 939-945
• 页数: 7页
• 分类号: R211|R379.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.10.015

摘要

目的 建立一种基于重组甘露糖结合凝集素(MBL)蛋白-磁珠富集技术快速检测血流感染新型隐球菌的方法,为临床确诊新型隐球菌感染提供指导.方法 利用Western blot方法检测重组MBL蛋白(Ml)与新型隐球菌定性结合的情况;利用磷酸缓冲盐溶液(PBS)与兔血模拟样本检测M1-protein A磁珠对不同浓度梯度的新型隐球菌的捕获情况;比较3种不同方法[方法1,M1-proteinA磁珠富集后直接进行qPCR鉴定;方法2,M1-proteinA磁珠富集后培养加质谱鉴定;方法3(金标准),血培养加质谱鉴定]检测血液新型隐球菌的优劣.结果 M1蛋白与新型隐球菌标准株及临床株普遍结合;不同浓度梯度新型隐球菌的PBS与兔血模拟阳性样本中,Ml-protein A磁珠复合体的富集效率为18.00％～83.00％;3种新型隐球菌鉴定方法中,方法l耗时最短(4.25 h),灵敏度为10菌落形成单位/毫升(CFU/ml);方法2灵敏度可达到≤l CFU/ml,总时间57h;作为临床诊断金标准的方法3灵敏度虽也能达到≤l CFU/ml,但耗时较长,需120 h.结论 采用磁珠富集结合qPCR、MALDI-TOF MS技术,比传统血培养大大缩短了检测时间,并且具有较高的灵敏度和特异度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈小萍	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	15	276	9.0	15.0
2	李文革	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	13	73	5.0	8.0
3	卢金星	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	25	140	7.0	10.0
4	郑皓	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	2	2	1.0	1.0
5	陈晓丽	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	0	0.0	0.0