苯丁酸钠通过下调CLDN4基因DNA甲基化对喉鳞状细胞癌增殖与凋亡的作用研究

• 作者: 卡衣赛尔·卡哈尔 艾力根·阿不都热依木 谭元元
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 喉鳞状细胞癌 Hep-2细胞 苯丁酸钠 CLDN4基因 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 62-68
• 页数: 7页
• 分类号: R856.76
• 字数: 4871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2020.07.014

摘要

目的 观察苯丁酸钠对喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞株Hep-2增殖及凋亡的作用,探讨其作用机制与紧密连接蛋白4(claudin4,CLDN4)基因甲基化的相关性.方法 使用0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mmol/L的苯丁酸钠分别处理Hep-2细胞24h,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术检测Hep-2细胞增殖、细胞周期与细胞凋亡,细胞免疫荧光法检测Hep-2细胞中caspase-3表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Hep-2细胞中DNA甲基转移酶(DN-MT1、DNMT3a) mRNA表达水平,免疫印迹试验(Western blot)法检测Hep-2细胞CLDN4蛋白表达水平,利用甲基化特异性PCR法(MSP)分析苯丁酸钠对Hep-2细胞CLDN4基因甲基化的影响.结果 苯丁酸钠呈剂量依赖地抑制Hep-2细胞增殖,使细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡;4.0mmol/L苯丁酸钠处理Hep-2细胞后,caspase-3蛋白表达明显增加;苯丁酸钠处理Hep-2细胞后,CLDN4蛋白表达水平随苯丁酸钠浓度增加而升高,而DNMT1、DNMT3a mRNA表达水平随苯丁酸钠浓度增加而下降;苯丁酸钠作用后CLDN4基因的高甲基化被逆转,并呈剂量依赖性.结论 苯丁酸钠可通过抑制甲基转移酶DNMT1、DNMT3a的表达使CLDN4基因去甲基化,从而抑制Hep-2细胞的增殖并诱导其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卡衣赛尔·卡哈尔	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉科	7	6	2.0	2.0
2	谭元元	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉科	12	8	2.0	2.0
3	艾力根·阿不都热依木	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉科	11	15	1.0	3.0