输尿管脱细胞基质涂层诱导脂肪干细胞分化的研究

• 作者: 张旭 王鹏超 符伟军 肖树伟
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 关键词: 细胞外基质 输尿管 脂肪干细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 692-697
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112330-20200402-00253

摘要

目的:探讨输尿管脱细胞基质(UDM)涂层对脂肪干细胞分化的影响。方法:2018年1月至2019年10月利用灌注法制备犬UDM，为UDM组，以正常犬输尿管为正常输尿管组。采用HE染色、DAPI染色和DNA定量检测评估UDM组和正常输尿管组中细胞成分的残留情况；Masson三色染色和胶原定量检测评估UDM组和正常输尿管组中胶原的保留情况；阿尔新蓝染色和糖胺聚糖定量检测评估UDM组和正常输尿管组中糖胺聚糖的分布及含量。分离培养犬脂肪间充质干细胞(cADMSCs)并用流式细胞仪鉴定。用胃蛋白酶消化法制备UDM涂层作为实验组，Ⅰ型鼠尾胶原涂层作为对照组，将cADMSCs种植在不同涂层上，免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测cADMSCs的分化情况。结果:HE和DAPI染色结果显示UDM组未见明显的细胞核残留；DNA定量检测结果显示UDM组中DNA含量[(38.87 ± 3.40) ng/mg]明显低于正常输尿管组[(1 694.63 ± 169.83) ng/mg， P<0.05]。Masson三色染色和胶原定量检测结果显示UDM组中胶原含量[(265.89 ± 16.40) μg/mg]与正常输尿管组[(288.73 ± 16.32) μg/mg]的差异无统计学意义( P>0.05)。阿尔新蓝染色结果显示UDM组中有糖胺聚糖分布；糖胺聚糖定量检测结果显示UDM组中糖胺聚糖含量[(1.57±0.19) μg/mg]低于正常输尿管组[(3.43±0.12) μg/mg] ( P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示，实验组培养3、7、10 d的α-SMA的表达量(2.51 ± 0.27、3.68 ± 0.33、4.91 ± 0.45)均高于相应对照组(0.97 ± 0.09、1.02 ± 0.10、1.00 ± 0.11)，差异均有统计学意义( P < 0.05)；随着培养时间增加，实验组α-SMA的表达量逐渐增加，差异均有统计学意义( P<0.05)，而对照组随着培养时间增加，α-SMA的表达量差异均无统计学意义( P > 0.05)。免疫荧光染色检测结果示实验组和对照组α-SMA的表达趋势与蛋白质印迹法检测结果一致。 结论:制备的UDM去除了细胞成分，且很好地保留了胶原结构和生物活性成分；UDM涂层可促进cADMSCs向平滑肌细胞分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张旭		194	947	14.0	21.0
2	符伟军		73	333	9.0	14.0
3	王鹏超		3	2	1.0	1.0
4	肖树伟		5	3	1.0	1.0