miR-486靶向DOCK3对肺间质纤维化的影响

• 作者: 张娜 石雪峰
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肺间质纤维化 微小RNA-486 胞质分裂作用因子3 转化生长因子 - β1 胶原蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1080-1085
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2020.10.012

摘要

目的 探讨微小RNA(miR)-486靶向胞质分裂作用因子3(DOCK3)对肺间质纤维化的影响.方法 将体外培养的人肺成纤维NHLF细胞分为对照组(正常培养)、诱导组[10 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激]、诱导+miR-NC组(转染模拟物阴性对照并给予TGF-β1刺激)、诱导+miR-486组(转染miR-486模拟物并给予TGF-β1刺激)、诱导+miR-486+vector组(共转染miR-486模拟物和空载体质粒并给予TGF-β1刺激)和诱导+miR-486+DOCK3组(共转染miR-486模拟物和DOCK3过表达载体质粒并给予TGF-β1刺激).采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-486和DOCK3靶向作用,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-486表达,免疫印迹法检测细胞中DOCK3、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)和上皮间质转化标志物E钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 miR-486可与DOCK3靶向结合.与对照组比较,诱导组细胞中miR-486和E-cadherin蛋白表达水平明显降低,而DOCK3、collagenⅠ、collagenⅢ、vimentin和 α-SMA蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与诱导组比较,诱导+miR-NC组细胞中上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05);与诱导+miR-NC组比较,诱导+miR-486组细胞中miR-486和E-cadherin蛋白表达水平明显升高,而DOCK3、collagenⅠ、collagenⅢ、vimentin和 α-SMA蛋白表达水平明显降低(P<0.05);诱导+miR-486+vector组和诱导+miR-486组之间上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05);但诱导+miR-486+DOCK3组细胞中DOCK3、collagenⅠ、collagenⅢ、vimentin和 α-SMA蛋白表达水平明显高于诱导+miR-486+vector组,而E-cadherin蛋白表达水平明显低于诱导+miR-486+vector组(P<0.05).结论 miR-486可通过靶向DOCK3抑制肺间质纤维化,其作用机制与抑制肺成纤维细胞胶原蛋白合成和上皮间质转化有关.