MEG3启动子甲基化在先天性巨结肠发病机制中的作用

• 作者: 刘远梅 毛羽晨 汤成艳 郑泽兵 金祝 高明娟 黄露
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 先天性巨结肠 母系表达基因3 信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1106-1112
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421158-20190827-00520

摘要

目的:探讨母系表达基因3(MEG3)启动子甲基化对p53/p21信号通路的调控及其在先天性巨结肠(HSCR)发病机制中的作用。方法:检测30例HSCR患儿有神经节细胞段、无神经节细胞段p53 mRNA、蛋白表达和MEG3基因启动子甲基化情况。应用MEG3过表达和沉默质粒转染人神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞株，建立MEG3过表达(MEG3-OE)组、MEG3抑制(MEG3-KD)组及空白对照(NC)组，使用氮杂胞苷(5-aza-CdR)调控各组后检测细胞株的增殖、凋亡情况及其p21 mRNA和蛋白的表达情况。结果:①无神经节细胞段与有神经节细胞段肠管组织p53 mRNA的相对表达量分别为10.56±0.37和2.24±0.3，p53蛋白的相对表达量分别为1 058.5±106.9和583.6±87.6，MEG3启动子甲基化率分别为(58.3±4.5)%和(33.3±1.3)%，两组比较，差异均有统计学意义( t＝95.67， P<0.05； t＝18.82， P<0.05； χ2＝6.25， P<0.05)。②加入氮杂胞苷共培养72 h时：MEG3-OE组较MEG3-KD组、NC组增殖能力明显增高(吸光度值分别为0.52±0.06、0.51±0.01、0.47±0.05)、凋亡率降低[共培养72 h时细胞凋亡率分别为(2.22±1.12)%、(4.08±0.57)%、(7.59±3.87)%]，且p21 mRNA及蛋白的相对表达量4.54±2.13和7.09±0.95均较另两组0.83±0.16、0.06±0.04和6.21±0.34、3.24±1.40显著升高，以上结果，各组间差异均具有统计学意义( P均<0.05)。 结论:HSCR中存在MEG3启动子高度甲基化，可能通过上调p53/p21信号通路介导神经嵴细胞增殖和凋亡，参与HSCR的发病。