低氧诱导因子1α调控蛋白酶激活受体1在低氧诱导心肌细胞凋亡中的作用及机制

• 作者: 孟庆雯 张园园 朱厚玲 王晓茜
• 来源期刊: 中国药业
• 学科: 医学
• 关键词: 低氧 低氧诱导因子1α 蛋白酶激活受体1 Bcl-2/Bax 细胞凋亡 作用机制
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 分类号: R972|R965
• 字数: 5420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-4931.2020.15.004

摘要

目的 探讨低氧条件下低氧诱导因子1α(HIF-1α)调控蛋白酶激活受体1(PAR1)在低氧诱导心肌细胞凋亡中的作用及机制.方法 将大鼠心肌细胞系H9c2细胞培养在95％O2及5％CO2环境中作为常氧组,培养在1％O2、94％N2、5％CO2环境中作为低氧组,并作不同时间梯度;采用四氮唑比色(MTT)法和原位末端转移酶标记(TUNEL)试剂盒法分别检测常氧组和低氧组中H9c2细胞活性和细胞凋亡情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(WB)法分别从mRNA和蛋白水平上检测HIF-1α和PAR1的表达.通过细胞转染siNC与PAR1 siRNA质粒24 h处理H9c2细胞,采用MTT法和TUN试剂盒检测细胞活性和细胞凋亡情况;通过qRT-PCR和WB法检测常氧组(A组),常氧+NC siRNA组(B组),低氧+NC siRNA组(C组)和低氧+PAR1 siRNA组(D组)H9c2细胞中Bcl-2与Bax的表达;在细胞转染HIF-1αsiRNA后再低氧处理H9c2细胞,采用RNA印迹(NB)法和WB法检测PAR1蛋白表达水平.结果 与A组比较,在低氧环境下,H9c2细胞活性降低并发生凋亡,HIF-1α和PAR1稳定高表达;与直接低氧处理组比较,在H9c2细胞中敲除PAR1后再低氧处理细胞,可明显缓解因低氧诱导的心肌细胞凋亡,提高H9c2细胞活力,在H9c2细胞中敲除PAR1后会使Bcl-2表达上调、Bax表达下调;细胞转染HIF-1αsiRNA后再低氧处理H9c2细胞时,PAR1的表达下降,表明PAR1受HIF-1α的正调控.结论 低氧条件下诱导H9c2心肌细胞的凋亡可能与低氧诱导因子HIF-1α正调控PAR1的表达有关,在H9c2细胞中敲除PAR1对处于低氧环境下心肌细胞的凋亡有阻断作用,可能源于上调Bcl-2的表达及降低Bax的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张园园	海南医学院第一附属医院心血管内科	5	3	1.0	1.0
2	王晓茜	海南医学院第一附属医院老年病科	2	7	1.0	2.0
3	孟庆雯	海南医学院第一附属医院心血管内科	9	21	3.0	4.0
4	朱厚玲	海南医学院第一附属医院心血管内科	2	0	0.0	0.0