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胰岛素自身抗体电化学发光法的建立与应用
胰岛素自身抗体电化学发光法的建立与应用
作者:
刘宁
周智广
张晓莉
李木文
李霞
王竹
颜湘
黄干
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
糖尿病,1型
胰岛素自身抗体
电化学发光法
摘要:
目的 在国内建立胰岛素自身抗体(IAA)的电化学发光检测法,并初步评价其应用价值.方法 胰岛素原采用磺基吡啶钌衍生物(Sulfo-tag)和生物素标记后,与血清IAA孵育结合.Meso Scale Discovery (MSD)链霉亲和素电化学发光平板捕获标记的抗原抗体复合物后,采用MSD电化学发光仪进行检测,以IAA指数≥0.005作为阳性阈值.通过优化检测条件后,采用微量平板放射免疫法比较两种方法的相关性和一致性.选取2016至2018年于中南大学湘雅二医院代谢内分泌科门诊或住院的新诊断1型糖尿病(T1DM)患者(55例)及其一级亲属(216名),以及健康志愿者(健康对照组,413名)为研究对象,检测其血清样本,初步评价电化学发光法检测IAA的临床应用价值.结果 优化条件包括:(1)生物素标记的胰岛素原和磺基吡啶钌衍生物标记的胰岛素原的最适浓度均为800 ng/ml;(2)酸化血清的方式为水浴30℃静置孵育45 min;(3)在反应体系中先加入35μl稀释后的抗原,再加入15μl Tris-HCl缓冲液,然后与酸化血清混匀孵育过夜能获得更高的信噪比(S/N).电化学发光法间隔3个月重复检测22例样本,IAA指数差异无统计学意义(P=0.095),阴/阳性判定完全一致;与微量平板放射免疫法检测IAA的一致率为93.7%(119/127)(Kappa值为0.858),指数呈正相关(相关系数r=0.749,P<0.001).电化学发光法受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.764(95%CI:0.669~0.858).电化学发光法检测T1DM患者IAA的阳性率为52.73%(29/55),明显高于健康对照组的0.76%(2/263) (P<0.001);检测T1DM一级亲属组的阳性率为0.93%(2/216),与健康对照组相比差异无统计学意义(P=0.854)o结论电化学发光法检测IAA有较高的灵敏度和特异度,操作简便无放射污染,具有很好的临床应用价值.
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篇名
胰岛素自身抗体电化学发光法的建立与应用
来源期刊
中华医学杂志
学科
关键词
糖尿病,1型
胰岛素自身抗体
电化学发光法
年,卷(期)
2020,(6)
所属期刊栏目
糖尿病基础与临床
研究方向
页码范围
424-429
页数
6页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2020.06.006
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糖尿病,1型
胰岛素自身抗体
电化学发光法
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中华医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
周刊
ISSN:
0376-2491
CN:
11-2137/R
开本:
大16开
出版地:
北京市西城区宣武门东河沿街69号
邮发代号:
2-588
创刊时间:
1915
语种:
chi
出版文献量(篇)
21130
总下载数(次)
49
总被引数(次)
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