菜豆环氧水解酶归一性水解间硝基环氧苯乙烷的研究

• 作者: 刘畅 文正 李闯 邬敏辰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 环氧水解酶 对映归一性水解 间硝基环氧苯乙烷 间硝基苯乙二醇
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 73-80
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0624

摘要

旨在研究菜豆环氧水解酶PvEH2对映归一性水解外消旋(rac-)间硝基环氧苯乙烷(mNSO)的特性,为制备光学纯(R)-间硝基苯乙二醇(mNPED)提供优良的生物催化剂.构建表达有重组PvEH2的工程菌E.coli/pveh2.以rac-mNSO为底物,借助手性色谱法分析E.coli/pveh2全细胞的EH活性和区域选择性.基于有机助溶剂种类和剂量对酶活性的影响,筛选并优化缓冲液/助溶剂反应体系.结果显示,在菜豆植株中,PvEH2基因的转录水平可能受体外环境诱导因素的影响.E.coli/pveh2的EH活性为15.4 U/g干细胞,水解反应的区域选择性系数 αS和 βR分别为90.3％ 和96.4％.在经过筛选优化的含有5％(V/V)丙三醇的磷酸盐缓冲液中,最高底物浓度为40 mmol/L,是原缓冲液体系的4倍.当反应至12 h时,所得(R)-mNPED的光学纯度eep及产率分别为84.9％ 和90.2％.E.coli/pveh2或PvEH2在水解rac-mNSO中表现出优秀的区域选择性,在制备光学纯(R)-mNPED中具有较好的应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学无锡医学院	163	1504	22.0	29.0
2	刘畅	江南大学无锡医学院	10	10	1.0	3.0
3	李闯	江南大学生物工程学院	10	7	2.0	2.0
4	文正	江南大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0