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目的:研究苦参碱对乙醛活化的大鼠肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:取体外培养的CFSC-8B细胞,分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱低、中、高浓度组(30、60、120μmol/L).除空白对照组外,其余各组细胞均加入200μmol/L乙醛溶液诱导活化,并同时加入相应药液(空白对照组和模型组加入等体积空白培养液),共同作用24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率.另取细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120μmol/L),同法活化和加药处理.分别采用酶消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)含量;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β1Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率显著升高(P<0.05);细胞培养液中Hyp、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量和细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3和Smad4 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),细胞中Smad7 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与模型组比较,阳性对照组和苦参碱中、高浓度组细胞存活率和细胞培养液中Hyp、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量以及细胞中α-SMA、Smad4 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),细胞中Smad7 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);阳性对照组和苦参碱高浓度组细胞中TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与苦参碱中浓度组比较,苦参碱高浓度组细胞各指标水平改善程度均更显著(P<0.05).结论:苦参碱能抑制乙醛活化的CFSC-8B细胞的增殖和胶原合成,且具有一定的浓度依赖性;其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路的传导有关.
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文献信息
篇名 苦参碱对乙醛活化的肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响及机制研究
来源期刊 中国药房 学科 医学
关键词 苦参碱 肝星状细胞 增殖 胶原合成 转化生长因子β1/Smad通路 机制
年,卷(期) 2020,(11) 所属期刊栏目 药学研究
研究方向 页码范围 1353-1358
页数 6页 分类号 R962
字数 5609字 语种 中文
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.12
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1 王晓丽 齐齐哈尔医学院药学院 88 225 8.0 10.0
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