氨基酸定点突变提高灵芝蛋白LZ-8热稳定性的研究

• 作者: 刘志屹 孙熙麟 孙非 戴璐 蒋振彦 黄伟
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: LZ-8 热稳定性 分子动力学模拟 温度因子 定点突变
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 23-28
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/J.cnki.biotech.bull.1985.2019-0529

摘要

通过氨基酸定点突变技术提高灵芝免疫调节蛋白LZ-8的热稳定性.通过分子动力学模拟结合温度因子预测对LZ-8氨基酸突变位点进行理性设计,在毕赤酵母X33菌株内构建并表达LZ-8突变体蛋白,采用HeLa细胞生长抑制实验和差示量热扫描分析检测并比较了LZ-8突变前后生物学活性及热力学参数.结果显示,LZ-8 N-端 α 螺旋为理论预测的温度敏感区域,在该区域进行F8W和R9K氨基酸双位点突变,突变后的LZ-8热稳定性提高,相变温度Tm上升0.92℃,相转变焓值 ΔH提高23.14 kJ/mol,但突变后LZ-8生物学活性基本不变,LZ-8和LZ-8突变体对HeLa细胞生长抑制的IC50值分别是2.238μg/mL和2.407μg/mL.通过理性设计氨基酸突变位点,获得了稳定性提高但生物学活性不变的灵芝免疫调节蛋白LZ-8的突变体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙非	吉林大学再生医学科学研究所	38	332	11.0	16.0
2	刘志屹	吉林大学再生医学科学研究所	29	262	10.0	15.0
3	黄伟	吉林大学再生医学科学研究所	9	9	2.0	2.0
4	戴璐	吉林大学再生医学科学研究所	5	10	1.0	3.0
5	孙熙麟	吉林大学药学院	1	0	0.0	0.0
6	蒋振彦	吉林大学药学院	1	0	0.0	0.0