Scleraxis慢病毒转染人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合

• 作者: 刘毅 尤奇 张骏 朱喜忠 杨继滨 汤井沣 邹刚 金瑛
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 人羊膜间充质干细胞 Scleraxis 基因转染 慢病毒 腱-骨愈合 组织工程
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 干细胞相关基础实验
• 页码范围: 2080-2086
• 页数: 7页
• 分类号: R459.9|R394.2|R686
• 字数: 7756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.1867

摘要

背景:人羊膜间充质干细胞来源广泛、免疫排斥低,具有多系分化潜能,研究证实Scleraxis基因能够诱导人羊膜间充质干细胞向韧带分化,加速腱-骨愈合进程.目的:探讨Scleraxis诱导人羊膜间充质干细胞分化后是否能够在体内促进兔腱-骨愈合,为临床腱-骨愈合提供新的思路和方向.方法:①经遵义医科大学附属医院伦理委员会批准,术前签署知情同意书,取健康足月产妇胎盘,经过2次胰酶消化分离培养人羊膜间充质干细胞,然后倒置显微镜下观察细胞形态,传代继续培养至第3代用于后续实验;②体外将携带有Scleraxis基因的慢病毒转染至人羊膜间充质干细胞,通过实时荧光定量PCR检测韧带相关基因的表达水平,免疫荧光检测韧带相关蛋白的表达水平;③将转染Scleraxis基因的人羊膜间充质干细胞注射到兔关节外腱-骨模型中,3个月后取标本观察腱-骨愈合情况.结果与结论:①传代至第3代的人羊膜间充质干细胞在倒置相差显微镜下呈长梭形、涡旋状贴壁生长;②第3代人羊膜间充质干细胞经过Scleraxis基因慢病毒感染24 h后表达绿色荧光,96 h荧光表达量最强且稳定;③CCK-8检测转染病毒后对细胞的生长速度无影响;④实时荧光定量PCR显示:慢病毒转染Scleraxis基因后,其mRNA表达量成倍的增加,并且韧带相关基因Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、Tenascin-C的mRNA表达量也明显提高;⑤免疫荧光结果显示:慢病毒转染Scleraxis基因后其韧带相关蛋白Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、Tenascin-C的表达水平提高;⑥动物体内实验证实:慢病毒转染Scleraxis基因后能够加速兔关节外腱-骨模型的腱-骨愈合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张骏	遵义医科大学附属医院骨一科	11	0	0.0	0.0
2	杨继滨	遵义医科大学附属医院骨一科	4	0	0.0	0.0
3	金瑛	遵义医科大学附属医院骨一科	5	0	0.0	0.0
4	邹刚	遵义医科大学附属医院骨一科	5	1	1.0	1.0
5	汤井沣	遵义医科大学附属医院骨一科	4	0	0.0	0.0
6	尤奇	遵义医科大学附属医院骨一科	3	0	0.0	0.0
7	朱喜忠	遵义医科大学附属医院骨一科	1	0	0.0	0.0