MITF在葡萄膜黑色素瘤细胞中的功能研究

• 作者: 徐微微 王丽花 陈伟伟
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 葡萄膜黑色素瘤 MITF 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 858-867
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.05.0013

摘要

该研究首先通过qRT-PCR和Westem blot发现,MITF在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的RNA水平及蛋白水平都显著高于葡萄膜黑色素细胞中的水平.通过NA干扰技术下调葡萄膜黑色素瘤细胞中的MITF的表达,采用MTS实验、细胞平板克隆实验发现,MITF下调后葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖能力被显著抑制.利用流式细胞术及Hoechst染色、Caspase 3/7活性检测发现其细胞周期受到阻滞,且凋亡水平增加.通过RTCA xCELLigence DP检测系统定量检测发现,si-MITF能抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的迁移及侵袭能力.Westem blot检测发现,MITF下调后葡萄膜黑色素瘤细胞中细胞周期相关蛋白p-Rb(retinoblastoma)、CDK2(cyclin-dependent kinase2)、CDK6、细胞周期蛋白D2(Cyclin D2)以及CyclinE2 的表达水平下调,与增殖及迁移侵袭密切相关的FAK(focal adhesion kinase)及ERK(extracellular signalregulated protein kirases)蛋白的磷酸化水平降低.该研究表明,在葡萄膜黑色素瘤细胞中下调MITF的表达后,细胞内部分周期相关蛋白、细胞增殖及迁移侵袭相关蛋白的表达均有下调,导致细胞发生G1期阻滞,使细胞的增殖、迁移及侵袭能力受到抑制,同时也促使细胞发生凋亡.