体外构建人羊膜间充质干细胞膜片及成骨分化潜能

• 作者: 刘毅 尤奇 张骏 汤井沣 沈梦杰 邹刚 金瑛
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 人羊膜间充质干细胞 细胞膜片 成骨诱导 骨组织工程
• 年，卷（期）: 2020,（25）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 4023-4027
• 页数: 5页
• 分类号: R459.9|R318|R681
• 字数: 5588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2104

摘要

背景:人羊膜间充质干细胞属于成体干细胞,其来自于废弃的胎盘,来源广泛,可以无创获取,具有免疫原性低、生长周期短等特点,是组织工程种子细胞的重要来源,目前人羊膜间充质干细胞已经用于临床糖尿病的治疗.目的:探索一种简便的方法构建人羊膜间充质干细胞膜片,并研究其成骨分化潜能.方法:将第3代人羊膜间充质干细胞高密度接种于普通培养皿中,加入成膜片诱导培养基以构建人羊膜间充质干细胞膜片,通过组织学染色以及扫描电镜观察细胞膜片的特性.取第3代人羊膜间充质干细胞高密度接种于培养皿中,加入成膜片诱导培养基培养7 d,再换用成骨诱导培养基培养14 d以构建成骨诱导的人羊膜间充质干细胞膜片.通过茜素红染色、免疫组化染色、碱性磷酸酶活性、RT-PCR以及Western blot检测人羊膜间充质干细胞膜片的成骨分化潜能.结果与结论:①苏木精-伊红染色可见人羊膜间充质干细胞膜片由多层细胞累积而成,细胞分布均匀;②扫描电镜观察可见人羊膜间充质干细胞膜片呈复层结构,胞外有大量的胞外基质产生,细胞包埋于胞外基质中;③人羊膜间充质干细胞膜片成骨诱导14 d,茜素红染色后可见橘红色沉淀,免疫组化染色后细胞周围有大量Ⅰ型胶原产生;④与未诱导的人羊膜间充质干细胞膜片相比,成骨诱导14 d后人羊膜间充质干细胞膜片碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.01),Ⅰ型胶原、骨钙蛋白、Runt相关转录子2的mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.05);⑤该实验应用一种简便、经济的方法在普通培养皿上成功构建了人羊膜间充质干细胞膜片,体外研究证实人羊膜间充质干细胞膜片具有良好的成骨分化潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张骏	遵义医科大学附属医院关节外科	11	0	0.0	0.0
2	金瑛	遵义医科大学附属医院关节外科	5	0	0.0	0.0
3	邹刚	遵义医科大学附属医院关节外科	5	1	1.0	1.0
4	汤井沣	遵义医科大学附属医院关节外科	4	0	0.0	0.0
5	刘毅	遵义医科大学附属医院关节外科	11	4	1.0	1.0
6	沈梦杰		4	2	1.0	1.0
7	尤奇	遵义医科大学附属医院关节外科	3	0	0.0	0.0