重楼皂苷Ⅰ通过抑制自噬减轻磷酸三钙磨损颗粒诱导成骨细胞损伤的实验研究

• 作者: 寿今豪 张云 张慧婷 杨子键 楼云玮 董凡赫 陈宇峰
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 重楼皂苷Ⅰ 磷酸三钙磨损颗粒 成骨细胞 凋亡 自噬
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 2501-2508
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020.09.027

摘要

目的 观察重楼皂苷Ⅰ (PPI)对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤的影响,并探讨其调控机制.方法 通过消化法从SD大鼠颅骨中获得原代成骨细胞,应用碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞.TCP磨损颗粒(0.1 mg/mL)与成骨细胞共孵育48 h制备成骨细胞损伤模型,实验随机分为对照组、模型组和PPI(30、100 μg/mL)组.CCK-8和化学比色法分别测定成骨细胞活力和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;实时荧光定量PCR法检测成骨细胞中ALP、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和Runt相关转录因子2(RUNX2) mRNA水平;Annexin-V/PI染色经流式细胞术定量分析成骨细胞凋亡情况;应用茜素红S染色观察成骨细胞矿化结节形成;Western blotting法检测成骨细胞中Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、Atg5、p62和微管相关蛋白1轻链3 (LC-3)蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组成骨细胞活性降低,特征蛋白ALP、CollagenⅠ、RUNX2 mRNA水平及矿化结节形成显著减少,LDH释放量、细胞凋亡和Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3等蛋白表达及LC-3II/LC-3I值明显增加,而Bcl-2和p62蛋白表达显著减少;与模型组比较,PPI各组成骨细胞活性升高,ALP、Collagen Ⅰ和RUNX2 mRNA水平和矿化结节形成明显增加,LDH释放和细胞凋亡显著减少,Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3蛋白表达及LC-3II/LC-3I值也明显减少,而Bcl-2和p62蛋白表达显著增加.结论 PPI可通过抑制自噬的活化而减轻TCP磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张云	绍兴文理学院医学院生理学教研室	12	18	2.0	3.0
2	杨子键	绍兴文理学院医学院生理学教研室	2	0	0.0	0.0
3	董凡赫	绍兴文理学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0
4	寿今豪	绍兴文理学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0
5	陈宇峰	绍兴文理学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0
6	张慧婷	绍兴文理学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0
7	楼云玮	绍兴文理学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0