基于Nrf2/HO-1信号通路的夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制研究

• 作者: 李斌 郭丰 黄山
• 来源期刊: 中国药房
• 学科: 医学
• 关键词: 夜关门 谷氨酸 血红素加氧酶1 核因子2 小鼠 海马细胞HT22 机制
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 药学研究
• 页码范围: 1303-1308
• 页数: 6页
• 分类号: R285
• 字数: 6907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.04

摘要

目的:基于核因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路研究夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制.方法:采用谷氨酸(5 mmol/L)建立HT22细胞损伤模型后,以水溶性维生素E为阳性对照(50μmol/L),采用MTT法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞增殖的影响.以水溶性维生素E为阳性对照(50μmol/L),采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针(DCFH-DA)法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞中活性氧(ROS)水平的影响;以HO-1激动剂钴-原卟啉为阳性对照,采用Western blotting法检测0(空白对照)、25、50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理24 h后对细胞中HO-1蛋白表达的影响;分别采用Western blotting法(药物分别处理0.5、1、1.5 h)和免疫荧光染色法(药物处理1 h)检测100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理后对细胞核内外Nrf2蛋白表达的影响.采用小干扰RNA(si-RNA)转染技术进行HO-1基因沉默后,考察100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物对谷氨酸诱导损伤细胞的存活率以及细胞中ROS水平的影响.结果:与空白对照比较,50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物均可显著升高细胞的存活率(P<0.05),并降低细胞中ROS水平(P<0.05);25、50、100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物均可显著升高细胞中HO-1蛋白表达水平(P<0.05),100μg/mL夜关门二氯甲烷提取物可显著降低细胞质中Nrf2蛋白水平并升高细胞核中Nrf2蛋白水平(P<0.05).HO-1基因沉默后,夜关门二氯甲烷提取物对谷氨酸诱导损伤细胞的促增殖以及降低ROS水平的作用被逆转(P<0.05).结论:夜关门二氯甲烷提取物可通过激活Nrf2信号通路,诱导HO-1蛋白的表达,从而发挥对谷氨酸诱导损伤HT22细胞的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李斌	青岛科技大学药学系	27	147	6.0	11.0
2	黄山	青岛科技大学药学系	36	238	10.0	13.0
3	郭丰	白城医学高等专科学校药学系	10	13	2.0	3.0