改良无血清法培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞

• 作者: 冯龙 刘蔷薇 冯泽国 袁维秀 徐龙河 张宏
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 原代海马神经元细胞 Neurobasal培养基 无血清培养 乳鼠 细胞培养
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1222-1225
• 页数: 4页
• 分类号: R614
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2020.12.012

摘要

目的 探讨改良无血清法培养新生SD乳鼠原代海马神经元细胞的效果及注意事项.方法 2018年2-12月共解剖分离72只出生24 h内SD乳鼠的海马,采取Neurobasal+B27改良无血清法培养原代海马神经元细胞.铺板前使用Invitroge自动细胞计数仪计数存活及死亡细胞.细胞贴壁生长0 d、3 d、6 d、9 d、12 d时使用激光共聚焦显微镜观察神经细胞形态变化.结果 平均每只乳鼠的海马可分离出(8.40±2.86)×105个神经细胞,其中存活细胞数为(5.48±1.73)×105,死亡细胞数为(3.08±1.30)×105,细胞总存活率为69％.细胞贴壁后第3天可观察到轴突长出,第6天树突长出,第9天和第12天可观察到周围神经细胞轴突、树突连成神经网络.贴壁后第3天胞体逐渐变大变饱满,最后呈扁圆形.细胞可存活4周左右.结论 改良无血清法可用于培养原代海马神经元细胞,快速精准解剖分离及轻柔有效吹打海马组织是培养出高存活率和高活性原代海马神经元细胞的关键.