14－3－3σ基因在调控内毒素/脂多糖诱导的人肺上皮细胞炎症反应中的作用

• 作者: 付忠华 刘名倬 廖新成 曾小平 王红梅 甘春霞 郭光华
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 内毒素类 脂多糖类 炎症 14－3－3σ Bax/B淋巴细胞瘤－2基因 肺上皮细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著·烧创伤相关肺损伤
• 页码范围: 260-266
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20191203-00450

摘要

目的:探讨14－3－3σ基因在调控内毒素/脂多糖(LPS)引发人肺上皮细胞炎症反应中的机制。方法:(1)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS－2B，按照随机数字表法分为对照组、PCMV6－14－3－3σ组，每组3孔。对照组细胞转染空载质粒，PCMV6－14－3－3σ组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒。转染48 h，蛋白质印迹法检测细胞内14－3－3σ蛋白表达。(2)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS－2B，按照随机数字表法分为对照组、PCMV6－14－3－3σ组、PCMV6－14－3－3σ＋LPS组、LPS组，每组3孔。对照组细胞转染空载质粒孵育42 h，PCMV6－14－3－3σ组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒孵育42 h，PCMV6－14－3－3σ＋LPS组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒42 h后加入LPS(终质量浓度1 μg/mL，下同)刺激6 h，LPS组细胞仅加入LPS刺激6 h。蛋白质印迹法检测Bax、B淋巴细胞瘤－2基因(Bcl－2)的蛋白表达，计算两者比值；流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时荧光定量反转录PCR技术检测细胞内肿瘤坏死因子α(TNF－α)、白细胞介素1β(IL－1β)mRNA表达量；酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中TNF－α、IL－1β含量。对数据行 t检验、单因素方差分析、LSD检验。 结果:(1)与对照组(0.78±0.04)比较，转染48 h PCMV6－14－3－3σ组细胞14－3－3σ蛋白表达水平(1.05±0.03)明显升高( t＝5.41, P<0.01)。(2)与对照组比较，PCMV6－14－3－3σ组细胞Bax/Bcl－2比值、细胞凋亡率、TNF－α mRNA及IL－1β mRNA表达量、细胞上清液中TNF－α及IL－1β含量均无明显变化( P>0.05)，LPS组细胞上述指标均明显升高或增加( P<0.01)。与LPS组比较，PCMV6－14－3－3σ＋LPS组细胞上述指标明显下降或减少( P<0.01)。 结论:14－3－3σ是调控细胞凋亡的重要因子，通过调节凋亡调控因子Bax/Bcl－2比值，抑制人肺上皮细胞凋亡，从而减轻LPS诱导的炎症反应。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王红梅		29	111	5.0	9.0
2	郭光华		142	812	14.0	18.0
3	付忠华		22	92	6.0	9.0
4	刘名倬		17	59	5.0	7.0
5	曾小平		26	83	6.0	8.0
6	廖新成		16	111	7.0	10.0
7	甘春霞		3	0	0.0	0.0