MYO1D对自噬溶酶体生成机制的研究

• 作者: 伊力亚斯·艾萨 冯学召 古丽努尔·阿不力米提 米娜 陈倩 雷秀英
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞自噬 肌球蛋白1D 自噬溶酶体
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1154-1158
• 页数: 5页
• 分类号: R723.14
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5551.2020.09.005

摘要

目的 探讨肌球蛋白1D(myosin 1d,MYO1D)对自噬溶酶体形成的影响及其作用机制.方法 免疫荧光观察大鼠肾上皮(normal rat kidney,NRK)细胞内MYO1D蛋白质与自噬体标志性蛋白质微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light Chain 3,LC3)的共定位关系;CRISPR-Cas9技术敲除NRK细胞中MYO1D基因,并分为MYO1D基因未敲除组,即NC组(non-specific control,NC)与MYO1D基因敲除组,即KO组(myosin1d knockout,KO);免疫荧光观察两组细胞中LC3与溶酶体关联膜蛋白1(lysosomal associated membrane protein 1,LAMP1)的共定位关系;蛋白质免疫印迹检测两组细胞自噬底物蛋白P62(p62/sequestosom-1,p62)的表达水平;对两组细胞进行荧光融合蛋白GFP-RFP-LC3(GFP-RFP-LC3)转染,在激光共聚焦显微镜下示踪自噬溶酶体的形成,并利用溶酶体标记探针(lyso-tracker red)检测溶酶体活性的变化.结果 在NRK细胞中,可观察到MYO1D与LC3存在显著的共定位关系;激光共聚焦显微镜下可观察到KO组中自噬溶酶体的形成受阻,荧光拟合程度降低;与NC组比较KO组P62蛋白表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);KO组内绿色荧光与红色荧光共同标记的自噬体比例升高;与NC组比较KO组溶酶体活性增强,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 MYO1D参与并影响自噬溶酶体的生成过程,其作用机制可能是MYO1D参与了自噬体转运至溶酶体并与之融合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	米娜		10	43	3.0	6.0
2	伊力亚斯·艾萨		4	3	1.0	1.0
3	冯学召		2	0	0.0	0.0
4	雷秀英		2	0	0.0	0.0
5	陈倩		2	0	0.0	0.0
6	古丽努尔·阿不力米提		2	0	0.0	0.0