β-伴大豆球蛋白α-亚基核心区的基因克隆、表达及纯化

• 作者: 周树义 巨倩 李垚熹 栾广忠 胡亚云 袁艳秋 高梦楠
• 来源期刊: 食品与机械
• 关键词: β-伴大豆球蛋白 α-亚基 重组蛋白 克隆 分离纯化
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 15-19,38
• 页数: 6页
• 字数: 5231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2020.05.003

摘要

利用 RT-PCR技术获得了齐黄 34 大豆种子的全长cDNA,采用自行设计的引物对目的基因αc进行扩增,并将目的基因与载体连接,构建了重组克隆载体 pGEM-αc.重组克隆载体经 Xho Ⅰ/EcoR Ⅰ双限制酶酶切鉴定后,与载体 pET-28a连接构建重组质粒 pET-28a-αc,经菌落PCR、双限制酶酶切及测序判定准确后,将其转入到感受态细胞E.coli BL2 1(DE3)中,当诱导温度为 3 7 ℃、菌液OD 600 nm值为 0.8、诱导剂(IPTG)浓度为 0.2 mmol/L,诱导时间为 9 h 时,重组α-亚基核心区蛋白分子质量为50 kU;工程菌 pET-28a-αc-BL21 经超声破裂、低温离心后,上清液利用镍离子亲和层析色谱柱经 AKTA 蛋白纯化系统纯化可以获得较高纯度的目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡亚云	西北农林科技大学食品学院	33	336	9.0	18.0
2	栾广忠	西北农林科技大学食品学院	21	64	4.0	7.0
3	巨倩	西北农林科技大学食品学院	4	0	0.0	0.0
4	李垚熹	西北农林科技大学食品学院	2	1	1.0	1.0
5	袁艳秋	西北农林科技大学食品学院	4	4	1.0	2.0
6	高梦楠	西北农林科技大学食品学院	1	0	0.0	0.0
7	周树义	西北农林科技大学食品学院	1	0	0.0	0.0