嗜酸乳杆菌对氧化应激仔猪小肠上皮细胞抗氧化能力和紧密连接蛋白表达的影响

• 作者: 曾永娣 游金明 罗波文 邹田德 郭晓波 陈丽玲
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜酸乳杆菌 IPEC-J2 抗氧化 紧密连接蛋白
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 猪营养与饲料
• 页码范围: 2108-2115
• 页数: 8页
• 分类号: S811.3
• 字数: 5034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2020.05.019

摘要

本研究旨在探讨嗜酸乳杆菌对氧化应激仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)抗氧化能力及紧密连接蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)和闭合蛋白(claudin)蛋白表达的影响.首先将IPEC-J2分为9组,分别加入0(对照)、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8和2.0 mmol/L的过氧化氢(H2O2),每组6个复孔,根据细胞活力确定最佳H2O2浓度.然后根据结果选择1.2 mmol/L的H2O2建立氧化应激IPEC-J2模型,将细胞分为7组,分别加入为0(对照)、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108、1.0×109和1.0×1010 CFU/mL嗜酸乳杆菌,每组6个复孔,处理时间为24 h,分析嗜酸乳杆菌对氧化应激IPEC-J2抗氧化能力.最后选择1.2 mmol/L的H2O2建立氧化应激IPEC-J2模型,加入1.0×109 CFU/mL嗜酸乳杆菌继续培养24 h,将细胞分为4组,分别是对照组(添加等量的磷酸盐缓冲液)、H2O2氧化应激组、嗜酸乳杆菌组、嗜酸乳杆菌组+H2O2组(先加入H2O2后加入嗜酸乳杆菌),每组6个重复,测定ZO-1、occludin和claudin蛋白的表达量.结果显示:1)与对照组相比,当H2O2浓度高于0.6 mmol/L时,细胞活力显著降低(P<0.05).与对照组和0.6～1.0 mmol/L H2O2组相比,当H2O2浓度处于1.2～1.8 mmol/L时,细胞活力显著下降(P<0.05).2)与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×108 CFU/mL时,细胞活力显著提高(P<0.05).3)在氧化应激条件下,随着嗜酸乳杆菌浓度的增加,细胞活力逐渐上升.与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度低于1.0×107 CFU/mL时,细胞活力显著降低(P<0.05),当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×109 CFU/mL时,细胞活力显著提高(P<0.05).4)与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×106 CFU/mL时,细胞中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×107 CFU/mL时,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著上升(P<0.05),其他各组中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性较对照组显著升高(P<0.05).5)与H2O2氧化应激组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组中细胞浆内ZO-1和occludin蛋白表达量显著降低(P<0.05);与对照组和H2O2氧化应激组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组中clau-din蛋白表达量显著降低(P<0.05).由此可知,嗜酸乳杆菌能够促进细胞的生长,增强细胞的抗氧化能力,降低胞浆内紧密连接蛋白的表达量.