沉默eIF3b基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力的影响

• 作者: 夏明汗 方茅 李延辉 谢敏如
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 真核细胞起始因子3b 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭 RNA干扰技术
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1538-1543
• 页数: 6页
• 分类号: R73.37|R737.9
• 字数: 4056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13820/j.cnki.gdyx.20194235

摘要

目的 探讨沉默eIF3b基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力的影响及其作用机制.方法 合成eIF3b基因的小分子干扰RNA(siRNA),转染入乳腺癌细胞株MCF-7,转染分3个组:Con-trol组(空白对照组)、Scramble组(转染非特异性对照组)和eIF3b-siRNA组(转染eIF3b-siRNA组).转染实验过程严格按操作说明书进行转染,其中eIF3b-siRNA组加入20 nmol/L转染eIF3b-siRNA,而Scramble组加入20 nmol/L Scramble RNA,Control组不作任何处理,转染24 h后收集细胞.应用qRT-PCR和Western blot免疫印迹法检测转染前后eIF3b基因mRNA和蛋白以及钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平;CCK-8法检测转染前后细胞增殖抑制率;运用Matri-gel胶模型细胞迁移和侵袭实验检测转染前后MCF-7细胞迁移和侵袭能力的变化.结果 RT-PCR结果显示eIF3b-siRNA组eIF3b mRNA相对表达水平为0.54±0.08,明显低于Control组(1.08±0.18)和Scramble组(1.12±0.16),差异有统计学意义(P<0.05).Western印迹法结果显示:与Control组(1.09±0.19)、Scram-ble组(1.05±0.17)相比,eIF3b-siRNA组eIF3b蛋白表达水平(0.45±0.06)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).在不同培养时间点上比较,eIF3b-siRNA组细胞增殖抑制率均明显高于Control组和Scramble组,差异有统计学意义(P<0.05).细胞迁移和侵袭实验中,eIF3b-siRNA组迁移和侵袭的细胞数均明显少于Control组和Scramble组,差异有统计学意义(P<0.05),而Control组与Scramble组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05).与Control组和Scramble组比较,eIF3b-siRNA组vimentin(0.26±0.02)、MMP-2(0.23±0.02)和MMP-9(0.46±0.03)表达水平明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05),而E-cadherin(1.32±0.19)表达水平明显增强.结论 下调eIF3b表达可有效地减弱乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力,可能与阻碍乳腺癌细胞的上皮-间质转化过程和促进MMP-2和MMP-9的分泌有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李延辉	东莞市石碣医院病理科	8	11	2.0	3.0
2	夏明汗	暨南大学附属第一医院病理科	20	146	7.0	11.0
3	谢敏如	东莞市石碣医院病理科	5	1	1.0	1.0
4	方茅	广州医科大学病理教研室	4	2	1.0	1.0