当归补血汤对内皮祖细胞氧化应激损伤的保护作用

• 作者: 王奇 莫友胜 郭静 黄水清
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 当归补血汤 内皮祖细胞 氧化应激 生物学功能 自噬
• 年，卷（期）: 2020,（20）
• 所属期刊栏目: 经典名方
• 页码范围: 39-45
• 页数: 7页
• 分类号: R2-0|R289|R54|R743
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20202038

摘要

目的:研究当归补血汤(DBT)对过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护作用.方法:采用密度梯度离心法获取小鼠骨髓来源的单核细胞,通过特定培养基培养并鉴定获得EPCs,实验分为空白组,模型组,DBT组(100,200,400 mg·L-1).采用噻唑蓝(MTT)比色法测定EPCs细胞存活率,构建H2O2诱导的细胞损伤模型;通过MTT,迁移小室(transwell),Matrigel基质胶,超氧化物荧光阴离子探针(DHE),分别检测EPCs增殖、迁移与体外血管形成能力,以及活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法(Westem blot)检测细胞自噬相关蛋白泛素结合蛋白SQSTM1(p62),微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型蛋白(LC3-Ⅱ)的蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组EPCs细胞增殖能力、迁移能力、成管腔数及小管分支长度均显著降低(P＜0.01),胞内ROS水平显著升高(P＜0.01),自噬标志性蛋白p62显著升高(P＜0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P＜0.01);与模型组比较,DBT组能呈浓度依赖性地升高EPCs增殖能力与迁移能力(P＜0.01),增加细胞成管腔数和小管分支长度(P＜0.01),降低胞内ROS水平(P＜0.01);此外,DBT呈浓度依赖性上调了LC3-Ⅱ蛋白的表达(P＜0.01),降低p62蛋白的表达(P＜0.01).结论:当归补血汤能提高氧化应激状态下的EPCs自噬水平,促进损伤的EPCs迁移、增殖能力与血管形成能力,保护氧化应激条件下内皮祖细胞的生物学功能.