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摘要:
目的 探讨miR-449a对骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响及机制.方法 体外分离培养人正常软骨细胞和OA软骨细胞,采用实时荧光定量PCR检测miR-449a的表达.将体外培养的OA软骨细胞分为miR-449amimics组(转染miR-449amimics)、mimics-NC组(转染miR-449a mimics阴性对照)、miR-449a inhibitor组(转染miR-449ainhibitor)和inhibitor-NC组(转染miR-449a inhibitor阴性时照)4组,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-449a表达,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-449a与Delta样配体I(DLL1)的靶向关系,免疫印迹法检测miR-449a对DLL1蛋白表达的影响;通过转染DLL1干扰序列siRNA-DLL1和DLL1过表达质粒GFP-DLL1构建DLL1低表达和过表达的OA软骨细胞,观察DLL1对OA软骨细胞凋亡的影响.结果 与人正常软骨细胞比较,OA软骨细胞中miR-449a的表达水平明显升高(P<0.05).与mimics-NC组比较,miR-449a mimics组细胞中miR-449a表达水平和细胞凋亡率明显升高;而miR-449a inhibitor组细胞中miR-449a的表达水平和细胞凋亡率较inhibitor-NC组明显降低(均P<0.05).DLL1是miR-449a的潜在靶基因,miR-449a可负向调控DLL1蛋白的表达.DLL1低表达的OA软骨细胞凋亡率较相应对照siRNA-NC组明显升高,而DLL1过表达后OA软骨细胞凋亡率较相应对照GFP组明显降低(P<0.05).结论 miR-449a可通过靶向调控DLL1表达促进OA软骨细胞凋亡.
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文献信息
篇名 miR-449a靶向DLL1调控骨关节炎软骨细胞的凋亡
来源期刊 西部医学 学科 医学
关键词 骨关节炎 miR-449a 软骨细胞 细胞凋亡 Delta样配体1
年,卷(期) 2020,(12) 所属期刊栏目 基础医学研究
研究方向 页码范围 1754-1758
页数 5页 分类号 R684.3
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1672-3511.2020.12.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王坚 2 1 1.0 1.0
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51-1654/R
大16开
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62-243
2003
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