白芷提取物促糖尿病溃疡新生血管成熟作用及机制研究

• 作者: 吴晓明 孙蓓 张晓娜 潘从清 翟仰魁 胡志波 郭俊 闫凤娟 雷思思
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 白芷提取物 糖尿病 溃疡 新生血管成熟 叉头转录因子 血管生成素-2
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 3223-3233
• 页数: 11页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020.12.014

摘要

目的 研究白芷提取物对自发2型糖尿病db/db (C57BLKS/J)小鼠皮肤溃疡新生血管成熟的影响与机制.方法 选取8周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组及白芷提取物组,同窝雄性db/n小鼠作为对照组.背部打孔法制备糖尿病溃疡小鼠模型.白芷提取物组以白芷提取物1.8 g/kg ig给药,对照组和模型组ig等量生理盐水,连续给药21d.记录创伤后2、4、7、11、14、21 d小鼠创面大致情况;对创伤后11d各组小鼠创面进行HE、免疫组化、免疫荧光染色观察创面组织形态、新生血管数量与成熟情况以及创面叉头转录因子(FOXO1)、血管生成素-2(Ang-2)在创面组织中的定位表达;体外根据不同干预条件,将内皮细胞分为正常糖浓度缺氧组、高糖缺氧组、高渗缺氧组、高糖缺氧+白芷提取物组.并将不同干预条件下内皮细胞与周细胞共培养,观察白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞对周细胞趋化作用及体外管状结构形成的影响.Western bloting法检测各组创面组织及内皮细胞中FOXO1、p-FOXO1、Ang-2蛋白水平及其上游蛋白激酶B(Akt)蛋白及磷酸化蛋白水平.结果 创伤后4、7、11、14、21d,白芷提取物组创面愈合速率、创面恢复大致情况、创面组织中血管形成数量及新生血管成熟情况明显优于模型组(P＜0.05);白芷提取物组中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显高于模型组(P＜0.05),白芷提取物组中p-Akt、p-FOXO1蛋白表达均低于模型组(P＜0.05);体外实验中白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞后,细胞中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),p-Akt,p-FOXO1蛋白表达明显增加(P＜0.05);此外,白芷提取物能提高高糖缺氧下内皮细胞对周细胞的趋化作用,促进高糖缺氧下内皮细胞与周细胞体外管状结构形成.结论 白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高db/db小鼠创面愈合速率和质量,其作用机制可能与下调FOXO1/Ang-2通路,实现内皮细胞对周细胞募集及管状结构形成有关.