盖子区域氨基酸的定点突变对T1脂肪酶酶学性质的影响

• 作者: 吕祥 夏小乐 朱彩林
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: T1脂肪酶 盖子结构 单点突变 组合突变 酶学性质
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 94-102
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2020-0220

摘要

T1脂肪酶来源于Geobacillus zalihae菌株,常作为生物催化剂广泛应用于各领域.为了综合改善T1脂肪酶的酶学性质,前期通过对该酶盖子结构进行理性设计得到3个效果较好的突变体L188M、A190L、A190Y,在此基础上,将单点突变体进行组合得到L188M/A190L和L188M/A 190Y两个复合突变体.在该实验中对突变体脂肪酶酶学性质展开研究,同时将单点与组合突变效果进行比较.结果 显示野生型及突变体最适pH均为9.0,复合突变体的最适温度提高5℃.单点突变及组合突变均使T1脂肪酶的酶学性质得到不同程度的改善,且复合突变体效果更显著.组合突变体使脂肪酶的温度、pH稳定性显著提高,L188M/A190L对于有机溶剂二甲基亚砜及正十六烷的耐受性为野生型的1.88倍和2.73倍,L188M/A190Y为野生型的1.96倍和2.58倍.此外,对C16和C18底物的选择性也明显增强,L188M/A190L为野生型的1.65和2.7倍,L188M/A190Y为野生型的1.5倍和2.25倍.该研究成果在一定程度上拓宽了T1脂肪酶的应用前景,同时为其他脂肪酶的改造提供了一定理论依据.