TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞与软骨细胞共培养后的增殖与凋亡

• 作者: 冯恩辉 刘焱杰 曹振武 王竣 田振江 陈博鉴 麦秀钧 黄启明 黄永明
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨性关节炎 软骨细胞 TDP43 RACK1 人脐带间充质干细胞 凋亡信号通路 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 1016-1022
• 页数: 7页
• 分类号: R459.9|R684.3|R[R364.7]
• 字数: 8457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2027

摘要

背景:在缺血缺氧条件下TDP43可能为MAPK信号通路关键的负调控因子,但其在骨性关节炎中对JNK及p38 MAPK信号通路的作用并不清楚.目的:研究野生型TDP43介导骨性关节炎中软骨细胞病变的靶基因RACK1表达,分析其发挥应激作用的效应.方法:以TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞,分析其体外分化为软骨细胞的能力.将TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞分别与人软骨细胞共培养12 d,倒置显微镜下观察软骨细胞形态变化;共培养第0,3,6,9,12天,分析软骨细胞增殖水平;共培养第3天,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率;共培养第3天,qRT-PCR检测软骨细胞内TDP43、RACK1、p38、JNK、AP-1和cl-xl的基因表达.结果与结论:①TDP43慢病毒载体转染后,人脐带间充质干细胞可分化为软骨细胞;②与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态发生显著改变,细胞变得粗大,并出现多个分枝情况;与空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态未出现变化,呈梭形贴壁生长;③软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,促使软骨细胞凋亡而抑制了细胞增殖(P<0.05);④软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,TDP43、RACK1、JNK、AP-1和Bcl-xl基因表达高于与未转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞(P<0.05);⑤结果表明,软骨细胞高表达TDP43可激活RACK1的表达,进而调控软细胞增殖和凋亡.