小非编码RNA-376b-3p在恶性胶质瘤患者血清外泌体中的表达及抗血管形成的作用机制

• 作者: 于锐 姜军 孟庆虎 曲春城 王成伟 王顺 王骥 魏胜程
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 神经胶质瘤 微小RNA 外泌体
• 年，卷（期）: 2020,（21）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1634-1639
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112137-20190911-02011

摘要

目的 筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的微小RNA(microRNA),探讨小非编码RNA-376b-3p(miR-376b-3p)对胶质瘤细胞的增殖、侵袭和肿瘤血管生成拟态的影响,并验证其对同源框蛋白D10(HOXD10)的靶向作用.方法 通过HiSeq/MiSeq高通量测序技术筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的microRNA表达谱及其靶基因和作用途径.小样本评估候选microRNA在高级别胶质瘤血清外泌体中的表达.采用U87胶质瘤细胞株分别转染对照抑制物、miR-376b-3p抑制物、对照模拟物和miR-376b-3p模拟物后,通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)实验、细胞迁移实验、血管形成拟态实验检测miR-376b-3p对胶质瘤细胞的增殖率、细胞侵袭能力和肿瘤血管生成拟态的影响.检测HOXD10的信使RNA(mRNA)和蛋白表达水平,评估miR-376b-3p对HOXD10的调控作用.结果 测序筛选到高级别胶质瘤血清外泌体与正常对照之间的差异microRNA个数为144个.在京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库富集到局灶性黏附、肿瘤蛋白多糖等参与胶质瘤调节的通路.小样本验证发现miR-376b-3p在高级别胶质瘤中下调(P＜0.01),对高级别胶质瘤的诊断的曲线下面积为0.85(P＜0.01).MTT实验显示转染后48～96 h,miR-376b-3p抑制物组增殖能力高于对照组,转染后48、72 h时,miR-376b-3p模拟物组增殖能力低于对照组.Transwell迁移实验显示,miR-376b-3p抑制物组穿膜细胞数量高于对照抑制物组,miR-376b-3p模拟物组穿膜细胞数量低于对照模拟物组.miR-376b-3p模拟物组的血管形成数低于对照模拟物组.miR-376b-3p抑制物下调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平,miR-376b-3p模拟物上调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平.结论 miR-376b-3p在高级别胶质瘤患者血清外泌体中下调,而上调miR-376b-3p后能够降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,抑制血管形成拟态的形成,同时能增加HOXD10的表达,有望同时抑制两种形式的血管形成,成为高级别胶质瘤的抗血管生成新的治疗靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲春城	山东大学第二医院神经外科	45	318	10.0	15.0
2	孟庆虎	山东大学第二医院神经外科	29	133	5.0	10.0
3	王成伟	山东大学第二医院神经外科	93	443	11.0	15.0
4	魏胜程	山东大学第二医院神经外科	17	98	5.0	9.0
5	姜军	山东大学第二医院神经外科	6	17	2.0	4.0
6	于锐	山东大学第二医院神经外科	10	87	5.0	9.0
7	王骥	山东大学第二医院神经外科	5	15	2.0	3.0
8	王顺	山东大学第二医院检验医学中心	7	20	3.0	4.0